桥梁抗风稳定性的概率评价

利用带有sop片段的表达载体克隆大肠杆菌色氨酸合成酶基因，构建得到稳定的色氨酸工程菌MIA60（pDWD60）。在摇瓶培养条件下，MIA60菌的色氨酸合生型菌株高16倍。SDS-PAGE结果表明，色氨酸合成酶占全菌可溶性蛋白的37%。营养条件对工程菌的质粒稳定性有明显影响，并与宿主有关。但是在不同营养条件下，对不同宿主菌，带有sop片段的重组质粒经150代培养后，保持均为100%。使用2.6升发酵罐对工程菌进行分批培养和补料分批培养时，带有sop片段的工程菌的质粒保持率均为100%。以上结果表明，sop片段可以单独在pMB1复制子控制下，对带有外源基因的重组质粒起到很强的稳定作用，不需要oriS的存在，也不需要ccd基因和repD基因的协助。这对于利用sop片段作为稳定因子构建的工程菌走向实用化具有重要意义。