RISK通路在胃泌素介导的心脏缺血再灌注损伤保护中的作用研究

Cardiac ischemia-reperfusion（I/R) injury is an important factor affecting the treatment and prognosis of myocardial infarction. Our previous study found that the prognosis of postprandial myocardial infarction was superior than that of preprandial and plasma gastrin increased to the peak thirty minutes after the meal, suggesting that gastrin may play a protective role in cardiac I/R injury. Our preliminary experiments also found that gastrin could inhibit cardiomyocytes apoptosis and reduce cardiac I/R damage area. The reperfusion injury salvage kinase (RISK) pathway plays an important role in the protection of I/R injury. Our preliminary experiment discovered that gastrin could activate Akt , one of the important molecules in the RISK pathway，in heart of I/R damage. Thus we hypothesize that gastrin activates downstream RISK pathway to inhibit apoptosis and exert a protective effect against cardiac I/R injury. Thus，In this study, we use ischemia-reperfusion heart model and cell hypoxia-reoxygenation model to study the protective role of gastrin in the cardiac I/R injury and its underlying mechanism and explore new way to protect the heart of I/R damage .

心脏缺血再灌注（Ischemia/ reperfusion，I/R）损伤是影响心肌梗塞治疗及预后的重要因素。我们的前期临床研究发现餐后发生心肌梗塞的病人预后优于餐前，而血浆胃泌素在餐后也有显著升高，并且在进食后0.5小时左右出现峰值，提示胃泌素可能在心脏I/R损伤中发挥保护作用。我们预实验发现胃泌素可以抑制心肌凋亡，减轻心脏I/R损伤。再灌注损伤救援激酶(reperfusion injury salvage kinase pathway, RISK) 途径在器官的I/R损伤的保护机制中扮演着重要的作用，我们通过预实验筛选发现胃泌素可以激活I/R心脏中的RISK途径的重要分子之一Akt。由此我们提出假设“胃泌素激活下游RISK通路抑制细胞凋亡，发挥对心脏I/R损伤的保护作用”。因此，本实验用离体和在体心脏缺血再灌注模型以及细胞缺氧复氧模型进行研究，明确胃泌素对心脏I/R损伤的保护作用及机制，

研究背景：研究发现，血浆胃泌素浓度升高与心血管死亡率呈负相关，心肌梗死(MI)患者血浆胃泌素水平升高。然而，胃泌素是否可以在MI中发挥保护作用不清楚。.研究内容：体内实验：成年C57BL/6小鼠结扎左冠状动脉前降支（LAD）建立心肌梗死模型后，皮下持续微泵胃泌素（120μg/Kg/day，泵内100μL）28天。通过ELISA检测试剂盒测量血浆胃泌素浓度。通过小动物超声仪检测左室收缩及舒张功能、通过Masson染色评估心肌纤维化、通过tunel染色评估梗死周围心肌的凋亡情况。使用免疫荧光染色及蛋白质印迹方法检测CD31和 VEGF蛋白表达以评估梗塞周围心肌中的血管生成情况。体外实验：我们用冠状动脉内皮细胞进行成管实验和细胞迁移实验以研究胃泌素诱导血管生成的机制。.结果：我们发现心肌梗死后小鼠血浆中胃泌素浓度增加，给予外源性胃泌素可以改善MI引起的心功能不全，并在MI后28天减少了心脏的纤维化。此外，胃泌素治疗显着降低了心肌细胞凋亡并增加了梗塞边界区域的血管生成，而不影响心肌细胞的增殖。体外结果显示，胃泌素通过PI3K/Akt/VEGF信号通路，促进人冠状动脉内皮细胞的迁移和血管新生。胆囊收缩素受体2(CCK2R)介导胃泌素的促血管新生作用，因为CCK2R 阻断剂CI988阻断了胃泌素介导的血管生成和对心功能的保护作用。.结论：我们的研究显示，胃泌素可以通过激活PI3K/Akt/VEGF信号通路促进小鼠心肌梗死后梗死区周围的血管新生从而改善心脏功能。我们的研究为保护心肌梗死后心脏功能提供了新的治疗策略。