艰难梭菌对甲硝唑的耐药性及耐药机制研究

由于艰难梭菌的毒力改变，近年来出现了艰难梭菌感染的暴发流行，病死率高，从而引起了医学界的关注；同时亦发现艰难梭菌对甲硝唑出现耐药，其耐药机制尚未明确，耐药性的出现是否与临床疗效的下降有关资料尚有限。有关艰难梭菌及其感染国际上近年有大量的研究，由于该菌分离困难，国内研究尚少。本研究为申请者在前期的研究基础上，计划对艰难梭菌临床分离株对甲硝唑的耐药性及耐药机制进行进一步的研究：①腹泻病人粪便标本分离培养艰难梭菌，测定毒素，核酸分型，检测对甲硝唑耐药情况；②通过细胞壁结构分析；外排机制研究；硝基转移酶编码基因的检测，以及其他耐药相关基因的测定明确耐药机制；③分析抗菌药物体外敏感性与体内疗效的关系。本研究对于阐明艰难梭菌甲硝唑耐药性的发生和传播机制，明确体外敏感性与临床疗效的关系，从而提出有效的艰难梭菌感染的预防和治疗策略具有重要意义。

艰难梭菌是医院获得性腹泻最为重要的病原菌。2000年以来，欧美地区艰难梭菌感染爆发流行，发病率和死亡率迅速上升；甲硝唑作为指南推荐的一线治疗药物其治愈率下降，复发率增高。本研究通过对华山医院艰难梭菌感染进行调查，以获知中国艰难梭菌对甲硝唑的耐药现状，同时应用转录组测序分析以及表型验证对其耐药机制进行研究。结果显示：2008.12-2009.5自华山医院共分离获得产毒素艰难梭菌78株，其中甲硝唑异质性耐药株18株，占23.1%，未发现耐药性与核酸或者毒素型别相关。艰难梭菌对甲硝唑耐药可能有多种机制共同参与：细胞壁合成增加导致药物摄入减少，ABC，MFS和MATE外排泵家族使得药物泵出增加，硝基转移酶活性变化导致甲硝唑在体内还原成活性成份减少，DNA修复能力增强以及孢子形成增加等。本研究结果提示应对中国的艰难梭菌感染进行监测特别是对耐药菌感染进行监测，并为艰难梭菌对甲硝唑的耐药机制的进一步研究提供了基础和方向。