hTERT基因修饰树突状细胞对脓毒症免疫功能的影响和作用机制研究

近年来hTETR基因修饰的树突状细胞疫苗对肿瘤的免疫治疗倍受关注。免疫抑制是脓毒症的重要特征。最新研究证实树突状细胞数量的下降与脓毒症的不良预后密切相关。为此，本项目探索性地将hTETR基因修饰树突状细胞靶向治疗脓毒症，观察其对免疫功能的影响。建立稳定的体外树突状细胞培养体系，构建重组真核表达载体hTERT-IRES2-EGFP，并转染树突状细胞，观察免疫表型变化和生物安全性指标，及其对体外LPS刺激的反应；构建脓毒症动物模型，体内验证脓毒症时树突状细胞存在免疫耐受现象，将hTETR基因修饰的树突状细胞移植入小鼠体内，观察免疫功能和各脏器功能损害程度，比较细胞凋亡情况，测定细胞因子的表达和细胞核内NF-κB含量，分析hTERT基因修饰的树突状细胞对脓毒症免疫功能的影响和作用机制，旨在进一步深入阐明脓毒症发病机制，并从一种新的角度拓宽脓毒症的治疗思路，为临床脓毒症免疫调理治疗提供实验依据。

近年来 hTETR 基因修饰的树突状细胞疫苗对肿瘤的免疫治疗倍受关注。免疫抑制是脓毒症的重要特征。最新研究证实树突状细胞数量的下降与脓毒症的不良预后密切相关。为此，本项目探索性地将 hTETR 基因修饰树突状细胞治疗脓毒症，观察其对免疫功能的影响。本项目通过建立稳定的体外树突状细胞培养体系，构建重组真核表达载体 hTERT-IRES2-EGFP，转染树突状细胞，观察免疫表型变化和生物安全性指标，及其对体外 LPS 刺激的反应；构建脓毒症的动物模型，体内验证脓毒症时树突状细胞存在免疫耐受现象，将 hTETR 基因修饰的树突状细胞移植入小鼠体内，观察免疫功能和各脏器功能损害程度，比较细胞凋亡情况，测定细胞因子的表达和细胞核内 NF-κB 含量，分析 hTERT 基因修饰的树突状细胞对脓毒症免疫功能的影响和作用机制。研究结果显示，不同管径支架置入的腹膜炎脓毒症模型与脓毒症的严重程度呈正相关。树突状细胞数量随着脓毒症的严重程度呈下降趋势，对负性共刺激分子高度表达，免疫活性显著下降，证实了树突状细胞的数量与功能变化与脓毒症的免疫抑制相关。将hTETR 基因转染修饰的树突状细胞呈明显增生和机能活跃，各脏器损害程度减轻，表明hTETR 基因对树突状细胞的免疫功能有调控作用，可能是脓毒症的免疫负向调控的另一重要途径。研究结果为脓毒症的防治提供了新思路，为进一步临床应用提供了理论依据和实验基础。