分子标记辅助创制α-亚基致敏蛋白缺失、高含硫氨基酸大豆新种质

大豆7S球蛋白α-亚基是主要的大豆致敏蛋白原之一。以往清除大豆抗原蛋白的致敏作用多集中于研究开发加工处理大豆的方法，这些方法都不同程度地增加了加工成本且不足以生产零抗原的大豆产品。7S球蛋白α-亚基缺失品种的回交选育是除去大豆致敏蛋白原的最佳方法，也是提高大豆蛋白含硫氨基酸含量的有效手段。分子标记辅助回交在提高育种效率、缩短育种年限、清除遗传累赘等方面极具应用潜力。利用分子标记辅助回交，理论上只要回交3代就可以得到理想的材料。本研究将利用已获得的具有黑龙江省主栽品种东农47遗传背景的不同世代的α-亚基缺失株系为试材，以分子标记辅助背景选择为手段，以杂交-回交转育方法为基础，α-亚基缺失基因用SDS-PAGE鉴定，遗传背景用SSR标记进行分析，通过遗传背景回复率相关分析，明确分子标记辅助遗传背景选择所需的适宜标记数、选择方式和群体大小，获得α-亚基缺失、高含硫氨基酸优良大豆新品系。

本研究以分子标记辅助遗传背景选择为手段,在轮回亲本“东农47”与α-亚基缺失特性的供体亲本“日B”之间筛选到98对多态性良好，分辨率较高，带型质量好、均匀覆盖大豆全基因组的SSR引物，占筛选引物总数的17.85%。以回交、三交等常规杂交育种方法为基础，每年春季SDS-PAGE技术筛选α-亚基缺失个体，夏季进行杂交、回交育种及SSR标记辅助遗传背景选择，冬季南繁加代，有效加快了育种进程，在回交BC2F5代筛选到综合农艺性状优良，致敏蛋白α-亚基缺失、遗传背景回复率为93.30%、含硫氨基酸含量（胱氨酸+蛋氨酸含量的和）、氨基酸总量，蛋白质总量比东农47分别高出0.09、2.44和3.98个百分点的最优品系CB63。比较单交，回交各个世代（BC1、BC2、BC3）及三交育种的结果表明：（1）致敏蛋白α-亚基缺失特性的导入，可以有效改变大豆种子氨基酸的组分配比，提高氨基酸和蛋白质总量。（2）在回交的早期世代（BC1或BC2代），能够有效的定性选择高含硫氨基酸品种。(3)三交是选育致敏蛋白α-亚基缺失、高含硫氨基酸新品种的有效育种手段，不同三交亲本组合的选择对育种结果有很大影响， 好的三交组合可以在导入致敏蛋白α-亚基缺失特性的同时，提高大豆种子的蛋白质总量、氨基酸总量及含硫氨基酸含量,并改良其氨基酸组分配比。