子痫抽搐中α7nAchR介导胆碱能抗炎通路调控小胶质细胞极化的机制研究

Eclampsia is characterized by mal seizures that cannot be attributed to other causes in women with preeclampsia. Despite many studies which have been conducted, precise mechanism leading to the development of eclampsia remains unclear. The cholinergic anti-inflammatory pathway (CAP) that regulated by α7-nicotinic acetylcholine receptor (α7-nAchR) is one of most important neuro-immune anti-inflammatory mechanism. More recently, our experimental evidence has shown that neuroinflammation induced by microglia activation is a common substrate in eclampsia of different etiologies, and activation of CAP can decreased microglial activation, attenuated neuronal loss in the brain tissue , and increased eclampsia-like seizure threshold, how is the mechanism? α7-nAchR is known expressed on microglia, and microglia polarization is important element of neuroinflammation, based on the previous work and the pre experiment we further evaluated the hypothesis that the valve of cholinergic anti-inflammatory pathway, α7-nAchRs, modulate microglia polarization toward proinflammatory M1 to anti-inflammatory M2 phenotypes, ameliorate neuroinflammation of eclampsia seizure, then inhibit the neuronal excitability. This study investigated the pregnant phenotype changes of α7-nAchR gene knockout rats in vivo and brain slices from these rats in vitro, use histology, patch clamp and molecular biology technique and ect, from the two levels of the whole animal and the isolated cells to find the systemic evidences support our hypothesis, then provide new theoretical basis and new target for preventive treatment of eclampsia.

子痫指在子痫前期基础上发生的不能用其他原因解释的痫性抽搐，发生的病理生理机制复杂。α7-N型乙酰胆碱受体（α7-nAchR）可介导胆碱能抗炎通路（CAP），是机体最重要的神经免疫抗炎机制之一。申请者在前期研究中发现，小胶质细胞活化致脑组织神经炎症是子痫发病的重要因素，而激活CAP可抑制类子痫大鼠脑组织中小胶质细胞活性，阻止神经元损伤，升高类子痫抽搐阈值，相关机制如何？已知α7-nAchR在小胶质细胞表达，小胶质细胞极化为神经炎症的要素，本课题在以往工作基础上提出假说：胆碱能抗炎通路上游“阀门”-α7-nAchR，调控小胶质细胞由M1型向M2型极化，减缓子痫神经炎症反应，抑制神经元异常性放电。拟应用α7-nAchR基因敲除孕鼠和从该鼠分离得到的离体脑片为主要工具，采用组织学、膜片钳和分子生物学等技术，从整体动物和离体细胞两个层面对该假说进行系统验证，为子痫防治提供新的理论依据和新的靶点。

子痫/子痫前期前期是一种常见的和极具危险的妊娠期疾病，它是孕产妇和新生儿死亡的主要原因。硫酸镁(MgSO4)一般用于重度子痫前期的治疗，具有抗炎和胎儿神经保护作用，但其具体机制尚不清楚。基于胎盘炎症与PE的关系，我们探究MgSO4对子痫前期样大鼠胎盘炎症的影响。.我们发现在lps处理的怀孕大鼠中，胎盘中炎性细胞因子白介素1β (IL-1β)、白介素12 (IL-12)、可溶性fms相关酪氨酸激酶1 (sFlt-1)的表达水平显著升高，抗炎因子APOE和IL-10的表达水平显著降低。同时伴有胎盘功能异常。LPS和Mgso4联合治疗可明显逆转PE样表型，降低高血压、蛋白尿、改善胎儿生长迟缓(FGR)，保护胎盘功能。且Mgso4对lps诱导的大鼠胎盘NK-信号通路过度激活有明显的抑制作用。.硫酸镁在分娩后的作用机制也很少被研究。为了进一步研究硫酸镁在子痫前期分娩后的作用及其可能的调节作用。研究分娩后1周的母胎结局和巨噬细胞谱。在产后第7天(PD)，它不仅能降低血压，尿蛋白，改善母鼠肾功能，而且还能改善不良的胎儿结局。母体肾和脑组织中M1巨噬细胞数量增加，M2巨噬细胞数量减少。. 子痫前期大鼠给予硫酸镁可显示抗炎和血管保护特性，从而保留内皮功能，有利于胎盘保护作用，改善妊娠结局。且进一步证实了子痫前期的病理生理与妊娠期间炎症反应的失调和多个靶器官M1巨噬细胞的激活有关。而MgSO4预防可通过促进母体肾和脑M2巨噬细胞极化来减轻子痫前期的产后效应。. 在临床上，为了分析妊娠期高血压( HDP) 孕妇晚孕期血流参数差异，了解超声多普勒多参数分析在 HDP 孕妇中的应用。得到极低出生体质量儿组和窒息组左子宫动脉( UtA) 及胎儿脐动脉( UA) 阻力指数(ＲI) 、搏动指数( PI) 及收缩期峰值流速与舒张期峰值流速比值( S /D) 改变( P＜0.05) 等结果。综合监测 UtA、UA 和大 脑中动脉( MCA)，对评估 HDP 妊娠结局有实际临床价值。. 我们还探讨早发型重度子痫前期期待治疗与围产结局之间的相关性。与立即终止妊娠组比较，期待治疗组新生儿出生体质量增加，HELLP 综合征、胎盘早剥、ICU 入住率以及新生儿死亡率减少( P＜0.05) 。严密监护下对病情稳定者行期待治疗以改善围产儿结局，但对孕周28周以下的患者是否行期待治疗仍需进