农药小分子的酶免疫化学研究及其在生态毒理学中的应用

甲基对硫磷是我国生产量大，应用面广的高毒有机机磷杀虫剂，常规残留分析使用气相色谱法或液相色谱法。本项目成功地使用酶联免疫吸附测定（ELISA）。首次从甲对硫磷分子的甲氧基部位，以6-氨基已酸为“间隔臂”合成了半抗原，通过活性酯法和混合酸酐法分别与载体蛋白质BSA和KLH偶联，制备了人工抗原，免疫功能诱导产生高效价抗体，可识别自由基甲基对硫磷，特异性较强，亲合性较好。I50=13.5mg/ml。对抗体进行了纯化和鉴定，制备了酶标抗体E-Ab，开发了直接酶标抗体检测法，在0.5-2.80mg/ml范围，甲基对硫灰浓度度与抗体结合率（B/Bo）呈半对数关系。高义反应试验表明，绝大部分结构类似的有机磷农药均不与抗体发生交义反应。但可同时检测毒性更大的对硫磷。