转多价病毒基因的番茄对不同属病毒的抗性

In recent years, with rapidly spreading of whiteflies, thrips and aphids in china, Tomato Yellow Leaf Curl Virus (TYLCV), Tomato Spotted Wilt Virus (TSWV) and Cucumber Mosaic Virus (CMV)has become major viruses on tomato, which mixedly occurred on the wide range of several provinces.. In this study,three conserved sequence which was obtained from three individual genes of three virus were selected to constructe a plant expression vector by fusion PCR methods. The three genes hanve been demonstrated relative to virus-transferring with whiteflies, thrips and aphids, respectively. After then,the transgenic tomato would be obtained by transformation. and then , combination of artificial rubinoculation with agrobacterium injection to evaluate and analyse the resistance of transgenic tomato to the three different genera viruses and the resistance genetic stability. In this study, based on the dsRNA plant expression vector has been constructed successfully, we aimed to establish a multi anti-different-virus system by the RNAi technology. Our result would be provide a new method to control different genera plant virusal dieases through RNAi.

番茄黄化曲叶病毒病（TYLCV）、番茄斑萎病毒病（TSWV）和黄瓜花叶病毒病（CMV）是番茄上的主要病毒病害。随着其传毒介体烟粉虱、蓟马、蚜虫的迅速扩散，其在我国多个省市大范围混合发生。本研究选取三个分别与昆虫介体烟粉虱、蓟马、蚜虫传毒相关的病毒基因，将三个基因的部分保守序列进行融合，构建含有三个基因序列融合片段的dsRNA植物表达载体，并转化番茄，获得转基因番茄。利用人工摩擦接种和农杆菌注射接种评价和分析dsRNA转基因番茄对三种不同属病毒的抗性及抗性遗传稳定性。本研究利用RNAi技术从病毒和昆虫介体传毒的相关基因入手，利用病毒中与昆虫传毒相关基因序列构建的dsRNA植物表达载体并转化番茄，获得基于RNAi 的多抗病毒转基因植株。研究结果对于利用RNAi技术同时防治不同属多种病毒具有重要的理论价值和应用前景。

番茄黄化曲叶病毒病（TYLCV）、番茄斑萎病毒病（TSWV）和黄瓜花叶病毒病（CMV）是番茄上的主要病毒病害。随着其传毒介体烟粉虱、蓟马、蚜虫的迅速扩散，其在我国多个省市大范围混合发生。本研究选取三个分别与昆虫介体烟粉虱、蓟马、蚜虫传毒相关的病毒基因，将三个基因的部分保守序列进行融合，构建含有三个基因序列融合片段的dsRNA植物表达载体，并转化番茄和烟草，获得转基因番茄和转基因烟草。利用人工摩擦接种和农杆菌注射接种评价和分析dsRNA转基因番茄对三种不同属病毒的抗性及抗性遗传稳定性。.设计引物，通过RT-PCR获得目标病毒基因片段,获得融合基因片段,获得dsRNA的植物表达载体，获得转基因烟草和转基因番茄，对转基因烟草和转基因番茄的T1代进行抗病毒分析等。.本研究利用RNAi技术从病毒和昆虫介体传毒的相关基因入手，利用病毒中与昆虫传毒相关基因序列构建的dsRNA植物表达载体并转化番茄和烟草，获得基于RNAi 的多抗病毒转基因植株。研究结果对于利用RNAi技术同时防治不同属多种病毒具有重要的理论价值和应用前景。