抗原肽修饰片段扩大结合多态性MHC分子兼容性的机理

MHC分子的肽结合区(MHC-PBR)是识别、提呈抗原和启动特异性免疫应答的关键。尽管它结合抗原肽具有兼容性特征，但仍存在少数畜禽因MHC-PBR不结合抗原肽而导致免疫失败。本项目拟修饰抗原肽中与PBR结合的片段，提高两者结合的亲和力，扩大抗原肽结合PBR的兼容性。项目组已克隆分析了鸡三个品种100多个MHC分子序列，获得了5个NDV和IBDV保护性抗原表位序列。拟通过点突变构建含PBR和抗原肽修饰片段的表达质粒，用共转染、免疫共沉淀和亲和层析等方法检测不同MHC-PBR单倍体与修饰抗原肽的亲和力，获得具高兼容性修饰片段；通过免疫已知MHC-PBR单倍体型鸡群，比较抗原肽修饰片段在动物免疫应答（抗体水平、细胞因子和MHC分子表达等）中的作用。该研究将为探明MHC兼容性识别抗原肽的分子机理，获得高兼容性的修饰片段，扩大有效免疫保护群体的范围，提高免疫应答效果，提供理论与实验依据。

MHC分子的肽结合区(MHC-PBR)在识别和递呈抗原并启动特异性免疫应答中起关作用键，而恒定链则在与PBR结合并在MHC递呈抗原肽中具辅助作用。本项目旨在选择与MHC-PBR结合的恒定链功能片段(及突变体)作为免疫载体，以载体修饰抗原肽，从而提高MHC兼容性递呈抗原肽效果而增强免疫应答。项目主要获得了以下结果：首先，明确了鸡和鼠Ii作为免疫载体可增强免疫效果。其次，发现这种增强效果是基于Ii功能片段与MHCII类分子结合的分子结构，即PBR兼容性结合区的关键位点具有识别Ii/抗原肽特征。第三，经过一系列筛选(Ii功能片段及其点突变片段)和比较，获得了具高度兼容性结合PBR的抗原肽的Ii修饰片段。第四，发现该修饰载体/抗原肽在免疫应答中能增强相应细胞因子分泌和体液免疫水平，其机理是该载体能同时结合MHCII类和I类分子，Ii载体的增强作用在不同MHC单倍体型个体间差异不明显。总之，该研究结果获得了高兼容性的修饰恒定链的功能片段，为提高免疫应答效果，提供了实验和理论依据。