TGF-β3缓释组织工程滑膜鞘促进屈指肌腱无瘢痕愈合的作用及机制研究

屈指肌腱损伤后，瘢痕愈合导致肌腱粘连形成，影响术后手指功能是手外科领域一个亟待解决的难题。近年来研究发现，TGF-β3作为体内TGF-β1的同分异构体，可以下调TGF-β1和TGF-β2的水平，起到TGF-β1抗体的效果，被认为是胚胎肌腱损伤后无瘢痕愈合的一个关键调节因子。同时，我们前期进行了一系列的肌腱滑膜化组织工程研究，首先提出肌腱表面滑膜化抗粘连的理念。本研究为进一步探索防治屈指肌腱粘连的方法，拟构建负载TGF-β3的缓释壳聚糖支架，种植滑膜细胞后，构建可吸收的组织工程滑膜鞘。在屈指肌腱愈合过程中，探讨TGF-β3缓释组织工程滑膜鞘促进屈指肌腱表面滑膜化，减少肌腱粘连形成的效果；同时，进一步探讨TGF-β3对肌腱细胞TGF-β/Smad信号传导通路的作用，初步阐明其促进屈指肌腱无瘢痕愈合的可能机制，为屈指肌腱粘连的防治提供新的方法。

为进一步探索防治屈指肌腱粘连的方法，本项目按照申请书要求完成了各部分的研究任务。第一、采用乳化交联法制备出了负载TGF3的壳聚糖缓释微球，测定其吸水膨胀率，扫描电镜观察并检测其体外缓释效果。第二、采用冷冻干燥法制备了壳聚糖三维支架膜，测定其水结合能力，并通过扫描电镜观察其形态学结构。后将负载TGF-β3的壳聚糖微球引入支架，扫面电镜观察了其形态结构。同时，培养滑膜细胞，将滑膜细胞收集后种植于含TGF-β3微球的壳聚糖三维支架，检测了微球和支架材料对滑膜细胞形态及细胞增殖的影响。第三、完成了负载TGF-3缓释组织工程滑膜鞘的生物相容性实验。建立了兔肌腱损伤模型，观察了肌腱愈合中，组织工程滑膜鞘修复损伤的肌腱瘢痕形成的情况，观察屈指肌腱无瘢痕愈合的效果。第四、培养出肌腱细胞，后以不同浓度的TGFβ3处理肌腱细胞，检测了Smad3、7表达水平的变化。并且放线菌酮、放线菌素D分别阻断胞内蛋白质和mRNA合成后，观察了TGF-3对Smad3、Smad7表达的影响。通过上述研究，我们构建出了负载TGF3缓释组织工程滑膜鞘促进屈指肌腱表面滑膜化，减少肌腱粘连形成，并且初步阐明其对肌腱细胞的作用机制，为屈指肌腱粘连的防治提供新的方法。本项目已发表SCI论著1篇，发表中文论著1篇，投稿SCI论文2篇，申请国家专利3项，培养研究生1名。