丁香酚麻醉作用与鲤鱼脑和脊髓中神经受体相关性的研究

Studies showed that the effect of general anesthetic was demonstrated when it combined with target position (mainly ligand-gated ion channel)，but to now, the exact mechanism of general anesthesia is still not clear, especially about the anesthesia mechanism on fish, was rare reported. To research possible ways of eugenol to anesthesia carp cyprinoid, the relationship between the anesthesia effect of eugenol and the receptor agonist and antagonist of Gly, GABA, NMDAR, nnACh, and the content of NO、cAMP、cGMP and the activity of ATPase and nitric oxide synthase in the spinal cord and brain of carp cyprinoid were determined. The result of the study would contribute to the development of efficiency and security anesthetic on fish and the development of anesthesiology.

目前的研究表明全身麻醉药是通过与中枢神经系统中许多靶位（主要是配体门控离子通道）相结合而发挥作用，但其作用的确切机制仍不能明确，尤其是全麻药对鱼类麻醉作用的机制鲜见相关报道。通过考察Gly、GABA、NMDAR、nnACh受体的激动剂和拮抗剂对丁香酚麻醉鲤鱼作用的影响；考察丁香酚麻醉后鲤鱼脑和脊髓中NO、cAMP、cGMP等的含量以及ATP 酶和一氧化氮合成酶（NOS）活性的变化，探讨丁香酚麻醉鲤鱼可能的途径，为高效、安全的鱼类麻醉剂开发和麻醉学的发展提供参考。

Gly受体和NMDA受体拮抗剂对丁香酚麻醉鲤鱼效果的研究显示：丁香酚对鲤鱼的麻醉作用不是通过Gly受体和NMDA受体来实现的；丁香酚麻醉可引起鲤鱼小脑和脊髓中甘氨酸、γ-氨基丁酸、谷氨酸和天冬氨酸含量的降低，但该作用属于非特异性中枢抑制作用的结果；NMDA受体激动剂可对抗丁香酚降低此4种氨基酸含量的作用，而拮抗剂的作用则相反。丁香酚可显著地降低鲤鱼中枢的Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性，说明丁香酚对鲤鱼的麻醉作用是与抑制中枢中Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性有关，丁香酚对延脑和间脑中此2种酶活力的影响较小是其作为鲤鱼安全麻醉剂的重要特性。丁香酚可极显著地升高鲤鱼中枢中的cAMP浓度和降低cGAMP浓度，说明丁香酚对鲤鱼的麻醉作用是与中枢cAMP和cGMP代谢关系密切。丁香酚可显著降低鲤鱼中枢NOS、iNOS活性和NO含量，丁香酚对鲤鱼的麻醉作用与中枢NO代谢紧密相关。丁香酚是鲤鱼的安全麻醉剂，其半数有效浓度（EC50）为26.374mg/L,半数致死浓度（LC50）为424.384mg/L, 麻醉鲤鱼的治疗指数为16.091。当丁香酚药浴液浓度为35mg/L时，丁香酚在鲤鱼血浆中Cmax为16.955μg/ml，t1/2α为0.085 h，t1/2β为4.156 h，AUC(0-t)为18.081mg/L·h。丁香酚在鲤鱼血浆中的分布消除规律符合二室模型特征，其血中药时曲线方程为C=28.573e-1.236t + 2.695e-0.226t。在24℃水温条件下,丁香酚在组织中的Tmax分别为肝和肾0.25h，脑0.5h，肌肉2h；丁香酚在肝脏含量最高，丁香酚在鲤鱼体内消除速度快，48h时后，各组织中均不能被检测到。丁香酚鲤麻醉后，鲤鱼在个组织中的残留量远低于国标（GB2760-2011）推荐的肉食品中添加的最高浓度（2000ug/g），因此，应用丁香酚麻醉鲤鱼后食用是安全的，无需休药期。