肿瘤细胞EGFR靶向的双功能免疫纳米胶束用于肿瘤MRI检测及药物治疗的研究

多种人类肿瘤在生长中伴有表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor，EGFR)过度表达，且与临床肿瘤侵犯性增加及预后不良密切相关。本研究中制备anti-EGFR抗体介导的载有超顺磁性氧化铁(SPIO)及抗癌药物表阿霉素(DOX)的聚乙二醇-聚乳酸(PEG-PDLLA)聚合物-西托昔单抗免疫胶束(Cetuximab-Immunomicelles)。将其运用于人非小细胞肺癌、宫颈癌细胞株，及人非小细胞肺癌裸鼠种植肿瘤模型，分析该胶束与肿瘤结合的效率及特异性、肿瘤表达EGFR水平与胶束结合的关系；使用临床型1.5T 磁共振及正反差技术(positive-contrast techniques)对结合胶束后的体外细胞悬液及静脉注射胶束后的肿瘤裸鼠进行MR成像，分析信号改变的特点。探索一种新的结合靶向肿瘤示踪、抗癌药物投递双功能的体内肿瘤MRI可见的治疗技术。

本项目成功制备了表面因子受体（EGFR ）靶向的纳米胶束和非靶向纳米胶束并对其进行了表征，显示所制备靶向胶束平均粒径为84.6 ± 6.2 nm，非靶向载药胶束的平均粒径为75.5 ± 4.0 nm；靶向胶束及非靶向胶束的DOX负载量分别为3.8% 和4.9%，SPIO的负载量分别为16.1% 和18.3%。体外细胞结合实验显示包裹了DOX的EGFR 靶向纳米胶束与EGFR高表达的A-431 细胞共孵育后，能够有效地与细胞结合并进入细胞，并显示出较非靶向胶束更高的细胞毒性作用。活体MRI成像实验，由于EGFR靶向的纳米胶束粒径较大，本实验改用粒径较小（<50nm）的人类表皮生长因子受体2（HER2）纳米胶束（Anti-HER2-SPIO-PEG-PCL）进行实验，在成功建立同鼠双肿瘤模型后，经尾静脉注射新合成纳米胶束后对荷瘤裸鼠进行活体MR T2*成像，结果显示HER2高表达的SK-BR-3瘤块信号明显减低，而低表达的MDA-MB-231瘤块信号变化不明显，显示靶向胶束初步的在体靶向显影价值。通过本研究，一方面制备用于MR 肿瘤示踪的免疫胶束；另一方面实现抗癌药物的靶向投递；其有望成为一种新的靶向性肿瘤磁共振成像及抗癌药。