miR-342对1型糖尿病高甲基化基因Foxp3的调控及机制研究

Regulatory T cell (Treg) deficiency plays an important role in the pathogenesis of type 1 diabetes. And Foxp3 is the key molecule for Treg differentiation and function. Our laboratory found that Foxp3 was strongly down-regulated due to its promoter hypermethylation in type 1 diabetes. However, its upstream mechanisms have not been clarified. In our previous study, it's confirmed that miR-342 was downexpressed in CD4+T cells from patients with type 1 diabetes, and miR-342 overexpression could upregulate the expression of Foxp3. It's also initially proved that DNMT1 and MeCP2 may be the target genes of miR-342. Based on the previous studying, we will determine whether miR-342 could regulate the expression and DNA methylation level of Foxp3 gene by targeting DNMT1 and MeCP2, to explore the reason of the downregulated miR-342 in type 1 diabetes. The study will be helpful to clarify the downreulation mechanism of Foxp3 in the extent of gene regulation by miR-342 in type 1 diabetes. In addition, it may provide the evidence for miR-342 being a new treatment target of type 1 diabetes.

调节性T细胞缺陷是1型糖尿病的重要发病机制。Foxp3是调控调节性T细胞分化和功能的关键分子。本实验室研究发现，1型糖尿病患者Foxp3基因由于受DNA甲基化影响而表达下调。然而其上游调控机制尚不清楚。我们前期研究证实1型糖尿病患者CD4+T细胞中miR-342表达降低，且miR-342具有促进Foxp3表达的作用；miR-342靶向DNA甲基转移酶1（DNMT1）及甲基化CpG结合蛋白2（MeCP2）。本研究拟在前期研究基础上，明确miR-342是否通过靶向DNMT1和MeCP2调控Foxp3表达及其甲基化修饰状态；并探讨1型糖尿病患者CD4+T细胞miR-342表达显著下调的机制。本研究将有助于阐明miR-342对CD4+T细胞Foxp3基因的调控及其在1型糖尿病发病机制中的作用，为筛选1型糖尿病新的治疗靶点提供理论依据和实验证据。

调节性T细胞缺陷是1型糖尿病的重要发病机制。Foxp3是调控调节性T细胞分化和功能的关键分子。本实验室研究发现，1型糖尿病患者Foxp3基因由于受DNA甲基化影响而表达下调。然而其上游调控机制尚不清楚。我们前期研究证实1型糖尿病患者CD4+T细胞中miR-342表达降低，且miR-342具有促进Foxp3表达的作用；miR-342靶向DNA甲基转移酶1（DNMT1）及甲基化CpG结合蛋白2（MeCP2）。本研究拟在前期研究基础上，探讨miR-342对1型糖尿病中高甲基化基因Foxp3表达及其甲基化修饰状态的调控及机制。. 本研究主要研究内容包括：（1）检测miR-342 在1 型糖尿病患者及正常对照CD4+T 细胞中的表达及其对调节性T 细胞数目和功能的影响；（2) 检测miR-342 对Foxp3 基因表达及其DNA 甲基化修饰状态的影响；（3) 证实DNMT1 和MeCP2 是miR-342 的直接靶基因，检测miR-342 通过靶向DNMT1 和MeCP2 调控Foxp3 基因的DNA 甲基化水平及表达。. 在本研究中，我们发现：miR-342在1型糖尿病患者CD4+T 细胞中的表达下调；miR-342能够减少调节性T细胞的数目，并使其抑制功能受损；miR-342能够增加其miR-342启动子甲基化水平，并降低Foxp3基因的表达；miR-342能够靶向抑制DNMT1和MeCP2，进而调控Foxp3基因的甲基化水平和表达情况。.综上所述，本研究明确1 型糖尿病中miR-342 通过靶向DNMT1 和MeCP2 调控调节性T 细胞关键功能基因Foxp3 甲基化修饰及表达的作用机理，为1 型糖尿病的发病机制提供极具优势的理论依据和实验证据；并发现miR-342 在1 型糖尿病各亚型患者CD4+T 细胞中的表达下调，为miR-342 作为治疗靶点提供理论基础。