异种移植动物模型—表达人CD59蛋白转基因鼠系的建立

CD59为人的补体调节蛋白，在异种动物体内表达有克服异种移植后的超急性排斥反应。本项目旨在建立一种表达人CD59蛋白的转基因鼠系，用以研究异种移植的超急性排斥及其克服以后的血管排斥和慢性排斥。在先期进行的预实验中，我们已将人CD59基因成功地转染到猪的血管内皮细胞，经检验证实确能抑制超急性排斥反应造成的血管内皮细胞溶解。在此基础上开始了转基因鼠的培育。首先构建了Pac-19-OMT-CD59及PEGFP-C1-OMT-CD59两种转基因结构，经酶切分析测序等处理，得到包括人CD59cDNA、GFP及各自启动子的约3.3Kb的基因片断，用显微注射法注入小鼠受精卵。经PCR，Southern杂交等筛选确定2只阳性鼠外源基因完全整合。为获得稳定且高表达的转基因鼠，后又更换启动子（CMV），进行功能检测。