蛋白质二硫键异构酶的蛋白工程:结构,酶活与分子伴侣

高效表达了N端多10个氨基酸的hPDI、此突变体具有与天然酶相同的二级结构、酶活和分子伴侣活性，且更易于纯化。克隆表在并纯化了去C端51个氨基酸的hPDI(a-b-b'-a')。该突变结体的二级结构与天然酶十分相似，保留了大部分天然酶活力，但丧失了多肽结合能力和帮助GAPDH重折叠分子伴侣活性，为PDIC未端的多肽结合部位是其分子伴侣活性的结构基础提价了直接的证据。通过它帮助APLA2和溶菌酶的重叠提出了PDI发挥折叠酶作用的模型，讨论了PDI的底物结合部位和多肽结合部位与具酶活力的分子伴侣活力的关系。a-b-b'-a'不表现抗分子伴侣活力，说明PDI的抗分子伴侣活力只有固有的分子伴侣活力在特定条件下的另一种表现，其结构基础还是多肽结合部位。