基于纳米操纵的单个生物大分子原位合成方法研究

单个生物分子研究已成为21世纪生命科学领域的一个重点研究方向。本项目拟将AFM纳米级操纵能力与灵敏DNA单分子检测技术相结合，建立单个DNA原位合成反应研究方法。首先利用动态组合模式"蘸笔"纳米刻蚀技术（CDDPN），将DNA合成反应液定位沉积在单个拉直DAN分子末端，通过提高衬底表面的疏水性减少反应液在衬底表面的扩散，控制反应在原来位置上进行，实现单个DNA分子的原位合成。反应产物经过单分子DNA分离和单分子PCR扩增后，DNA测序验证反应结果。在此基础上，研究合成反应的影响因素，探索提高合成产率的方法。本项目的研究可为基因改性研究，如插入、连接、突变等，提供新途经，为单个生物分子的局域反应研究提供可能的方法。