探索RGD修饰可降解三维水凝胶负荷VEGF、bFGF及内皮祖细胞诱导血管再生的机制

软组织缺损等缺血性疾病是骨科最棘手的临床问题。血管生长因子介导的治疗性血管发生和内皮祖细胞（EPCs）介导的治疗性血管新生将是解决这些问题的新方向。而两者是密不可分的过程，联合应用将更有利于缺血性疾病的治疗。如何保持EPCs的活性且与宿主血管整合？如何保证血管生长因子的持续缓慢释放？则是联合治疗的关键。最新研究发现，RGD修饰、MMP敏感的PEG水凝胶是一种优秀的药物缓释系统和可降解的细胞移植载体。所以本课题组设计：合成RGD肽修饰的、对MMP敏感的PEG水凝胶，并以此水凝胶同时封装bFGF 、VEGF和EPCs，联合治疗大鼠背部软组织缺损模型。观察此水凝胶作为细胞移植载体和细胞因子缓释系统的效果。分别研究bFGF 、VEGF介导的血管新生，EPCs介导的血管发生，及其两者之间的协同效应。如能获得预期结果，将为治疗软组织缺损骨质外露、褥疮、肢体坏死、骨坏死等缺血性疾病提供更广阔的空间。

软组织缺损等缺血性疾病是骨科最棘手的临床问题。血管生长因子介导的治疗性血管发生和内皮祖细胞（EPCs）介导的治疗性血管新生将是解决这些问题的新方向。而两者是密不可分的过程，联合应用将更有利于缺血性疾病的治疗。如何保持 EPCs 的活性且与宿主血管整合？如何保证血管生长因子的持续缓慢释放？则是联合治疗的关键。最新研究发现，RGD 修饰、MMP 敏感的 PEG 水凝胶是一种优秀的药物缓释系统和可降解的细胞移植载体。所以本课题组设计：合成 RGD 肽修饰的、对 MMP 敏感的 PEG 水凝胶，并以此水凝胶同时封装bFGF 、VEGF 和 EPCs，联合治疗大鼠背部软组织缺损模型。观察此水凝胶作为细胞移植载体和细胞因子缓释系统的效果。分别研究 bFGF 、VEGF 介导的血管新生，EPCs 介导的血管发生，及其两者之间的协同效应。如能获得预期结果，将为治疗软组织缺损骨质外露、褥疮、肢体坏死、骨坏死等缺血性疾病提供更广阔的空间。.本课题组成功分离、培养了大鼠骨髓来源的内皮祖细胞（EPCs），倒置显微镜下观察EPCs的生长规律及其形态变化，以CD34、CD133和VEGFR免疫荧光染色初步鉴定了EPCs的抗原阳性率，同时以Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白（Dil-ac-LDL）检测原代细胞的吞噬功能，最后通过基质胶三维培养观察了EPCs的体外成管能力。同时初步合成了RGD肽修饰、对MMP敏感的PEG水凝胶，倒置显微镜下观察EPCs在水凝胶上生长情况的变化。