胰岛素抵抗相关miRNAs的鉴定及功能研究

胰岛素抵抗（IR）贯穿了2型糖尿病发生发展的全过程，因此，阐明IR发生的分子机制是国内外糖尿病研究的重要课题。我们通过研读文献并结合本课题组的前期工作，提出"miRNA在IR形成过程中发挥重要的调节作用，其机制可能与miRNAs作用其靶基因，导致胰岛素信号传导通路中某些蛋白表达改变或者脂肪细胞的功能异常，最终影响GLUT4转位"的学术思想。本项目拟采用高糖高胰岛素诱导3T3-L1脂肪细胞建立IR模型，miRNA芯片和Northern-blot技术挑选并鉴定几个与IR相关的miRNAs。采用腺病毒介导的基因转染与干扰技术、荧光素酶报告基因分析和Western-blot等方法，观察分析miRNAs基因高表达或沉默对IR的调节作用及机制。采用转基因技术建立高表达miRNAs的转基因小鼠，整体上研究miRNAs与IR的关系。该项目为阐明IR及2型糖尿病的发病机制与防治提供有价值的思路和实验依据。

胰岛素抵抗（IR）贯穿了2型糖尿病发生发展的全过程，因此，阐明IR发生的分子机制是国内外糖尿病研究的重要课题。我们通过采用高糖高胰岛素诱导3T3-L1脂肪细胞建立IR模型，miRNA芯片和real-time PCR技术挑选并鉴定3个与IR相关的miRNAs (miR-320, miR-21和miR-375)。随后通过相关实验，观察分析这3个miRNAs对IR的调节作用及机制。结果显示：miR-21可通过PTEN-AKT信号途径改善胰岛素抵抗；而反义miR-320可通过胰岛素-PI3K信号通路调节胰岛素的敏感性；miR-375可通过ERK1/2-PPARγ-aP2信号途径促进3T3-L1前脂肪细胞分化。此外，我们还发现miR-143可能调控小鼠间充质干细胞MSC的成脂分化。该项目的完成为阐明IR及2型糖尿病的发病机制与防治提供有价值的思路和实验依据，为开发新的IR或糖尿病药物提供重要的治疗靶点，为IR及糖尿病等代谢性疾病的防治提供新思路。