LncRNA H19在心肌梗死后淋巴重塑中的作用与机制研究

Myocardial infarction (MI) is one of the most common diseases that seriously threaten life and health and lymphatic remodeling plays an important role in the prognosis of MI. Our previous studies showed that the expression of LncRNA H19 was increased in lymphatic endothelial cells of infarcted heart. Inhibiting of H19 reduced the lymphatic angiogenesis and lymphatic diameter, then aggravated the inflammatory reaction and adverse cardiac remodeling, resulting in an increase of ventricular rupture and a decrease of cardiac function. Therefore, we propose a hypothesis: H19 promotes the proliferation and migration of lymphatic endothelial cells, improves lymphatic remodeling, alleviates cardiac inflammation and adverse remodeling, and finally plays a protective role in MI. In this study, we intend to model the MI by ligating the anterior descending coronary artery, and construct lymphatic endothelial cells-targeting liposome which encapsulated H19 inhibitors to investigate the effect of H19 in lymphatic endothelial cells on the lymphatic remodeling after MI. RNA immunoprecipitation technology, protein spectrum analysis and bioinformatics are used to clarify the molecular mechanism of H19 on regulating lymphatic remodeling. Our study aims to find a new target for the treatment of MI.

冠心病心肌梗死是严重威胁人类生命健康的最常见疾病之一，淋巴重塑对心肌梗死的预后起重要作用。我们前期研究发现，梗死心脏的淋巴管内皮细胞中LncRNA H19表达增加，抑制H19可使淋巴管新生减少，直径减小，进而加重心脏的炎症反应和不良重塑，最终导致心室破裂率增加及心功能下降。据此，我们提出科学假设：H19通过促进淋巴管内皮细胞增殖、迁移，从而改善淋巴重塑，减轻心脏炎症反应和不良重塑，在心肌梗死中发挥保护作用。本研究中，我们拟以结扎小鼠冠状动脉前降支模拟心肌梗死，构建淋巴管内皮细胞靶向脂质体包裹H19抑制剂探讨淋巴管内皮中的H19对心梗后淋巴重塑的影响，并结合RNA免疫沉淀技术、蛋白质谱分析和生物信息学等方法明确H19调控心梗后淋巴重塑的分子机制，从而确定改善心肌梗死预后的新靶点。

冠心病心肌梗死严重威胁人类生命健康，有研究表明淋巴重塑对心肌梗死的预后起重要作用，因此明确淋巴重塑的调节机制对急性心肌梗死的防治有极大的意义。我们前期研究发现，梗死心脏的淋巴管内皮细胞中LncRNA H19表达增加，抑制H19可使淋巴管新生减少，直径减小，进而加重心脏的炎症反应和不良重塑，最终导致心室破裂率增加及心功能下降。但H19调节梗死心脏淋巴重塑的机制尚不明确。.本项目主要完成了以下工作：.① 在急性心肌梗小鼠上抑制及过表达H19后观察对梗死心脏淋巴重塑的影响，明确了H19能够改善梗死心脏的淋巴重塑及急性心梗死的预后；通过构建淋巴管内皮细胞靶向脂质体，进一步明确淋巴管内皮细胞中H19能够改善淋巴重塑的作用，并探索了H19作为治疗靶点的潜在可能性；.② 在淋巴管内皮细胞中抑制及过表达H19后探索对淋巴管内皮细胞功能的影响，观察到H19能够促进淋巴管内皮细胞的增殖与迁移，而且渗透性无明显，进而明确了H19调节淋巴重塑的病理机制；.③ 分子水平上，通过转录组测序发现并证实H19促进VEGFR3的表达，VEGFR3是参与淋巴管生成的核心蛋白之一；同时，我们应用RNA-pull down结合质谱检测，观察到H19可直接与Srsf1相结合，并通过调节Srsf1与VEGFR3结合影响VEGFR3的表达，最终明确H19调控LEC功能的分子机制。.本项目对H19调节淋巴重塑的作用的机制进行了研究，并为临床探索如何改善急性心肌梗死预后提供了新思路。