miR-155负向调控肺癌细胞凋亡及DNA损伤的机制及其在肺癌发生、发展中的作用研究

肺癌的发生、发展与各种因素造成的凋亡抑制、增殖失控及转移倾向呈正相关关系，而与免疫防御呈负相关关系。我们前期研究发现，微小RNA家族成员miR-155可负向调控免疫防御。而最新研究发现，miR-155在肺癌细胞中高表达，并与肺癌患者的预后不良相关，提示miR-155与肺癌的发生、发展呈正相关关系，但其中的机制不明。结合最新的研究进展及我们的生物信息学分析，我们推测凋亡蛋白酶活化因子1（Apoptotic protease activating factor-1, Apaf-1）可能是miR-155负向调控肺癌细胞凋亡及DNA损伤，进而促肺癌发生、发展的核心靶点，但尚需研究来证实。我们拟分别在体内和体外模拟miR-155和Apaf-1的表达状况改变，观察下游凋亡和DNA损伤相关信号的变化情况，明确miR-155促肺癌发生、发展的机制，为阐明肺癌发病机理提供实验依据。

已经按照原计划完成了全部研究内容，达到预期目标，本研究发现：. 肺癌组织中miR-155的表达明显高于癌旁，高于正常组织，而癌组织中Apaf-1的表达明显低于癌旁组织，低于正常组织，提示miR-155高表达及Apaf-1低表达与肺癌的发生、发展相关；. 诱导MiR-155表达上调可抑制Apaf-1的表达，并导致肺癌细胞凋亡相关信号分子BAX及Capase-9的表达下调、DNA损伤减轻，诱导miR-155表达下调可诱导Apaf-1表达增加，并导致BAX及Capase-9的表达上调、DNA损伤加重，提示miR-155可通过负向调控Apaf-1的表达而负向调控肺癌细胞凋亡及DNA损伤，参与肺癌的发生、发展；. 抑制miR-155表达可增加肺癌细胞对顺铂的敏感性，其机制为诱导Apaf-1表达上调，协同增加顺铂破坏线粒体膜电位稳态平衡，诱导细胞中钙离子浓度升高，促进细胞色素C的释放，从而促进顺铂的细胞凋亡、DNA损伤诱导作用，提示miR-155作为靶点，在肺癌的治疗中具有潜在应用价值，利用外源性药物靶向抑制miR-155的表达可以为肺癌治疗提供一个新的策略。. 基于本课题的研究结果，已发表SCI论文5篇，总影响因子11.652分，其中关于miR-155对协同顺铂的凋亡诱导及DNA损伤作用的研究结果已经以论著发表于Nature系列杂志的《Cancer Gene Therapy》上，同时，研究论文被在国际呼吸学界两个顶级会议之一的欧洲呼吸病学会年会（European Respiratory Society Congress, 2012, 奥地利维也纳）接受参加“肺癌生物学新进展（New aspects of lung cancer biology）”分会场学术交流；另外，关于深入探讨miR-155诱导肺癌细胞凋亡及DNA损伤机制的研究结果，已形成论著投稿于《Molecular Cancer Therapeutics》杂志。