CTGF诱导腹膜间皮细胞上皮-间质转化在胃癌腹膜转移中作用的研究

胃癌腹膜转移是特殊的肿瘤细胞（种子）与腹膜适宜的微环境（土壤）相互作用的结果。现有的研究多从癌细胞角度探讨腹膜转移的形成机制，有关腹膜微环境变化在腹膜转移中作用的研究甚少。前期实验中，我们在胃癌腹膜转移患者体内观察到间皮细胞的异常，并经体外实验证实，推测以间皮细胞异常为主的腹膜微环境变化可能为癌细胞粘附侵袭提供了适宜的"土壤"环境，其中EMT可能是微环境变化的重要事件。此外，我们研究发现体外应用重组人CTGF可使腹膜间皮细胞发生EMT改变；发生EMT的间皮细胞与胃癌细胞的粘附显著增加，因此我们推测CTGF在腹膜间皮细胞EMT及促进癌细胞腹膜转移的过程中可能是一个新的重要的诱导因子。为了验证以上的假设，本研究旨在证实CTGF可诱导腹膜间皮细胞发生EMT，并通过构建体外、体内EMT模型，明确间皮细胞EMT与胃癌细胞腹膜转移的关系，同时通过寻找CTGF的靶基因来阐明其作用机制。

上皮-间质转化是指完全分化的上皮细胞表型改变以后转变成完全分化的间质细胞,通常转变为成纤维细胞或肌成纤维细胞的过程。EMT在正常胚胎发育及组织创伤修复中发挥重要作用，病理状态下EMT主要参与器官纤维化与肿瘤浸润转移。EMT受多种细胞因子调节，近年来研究发现, CTGF与细胞外基质相互作用,调节多种组织恶性肿瘤的发生发展、血管生成及浸润转移。本研究首先考察不同病期、不同生物学特点胃癌病人组织标本中CTGF表达及腹膜EMT状况，发现与其远端正常组织相比，胃癌组织中CTGF的表达明显增高。同时通过对临床病理资料的分析发现CTGF的高表达与胃癌的组织学分型，淋巴结转移及腹膜转移密切相关。高表达CTGF的胃癌患者生存期明显低于低表达CTGF的患者。患者病期越晚，腹膜EMT程度越高。其次通过体外及体内实验证实了CTGF可诱导腹膜间皮细胞发生EMT，并通过构建体内、外EMT模型，明确腹膜间皮细胞EMT可促进胃癌腹膜转移。我们通过小RNA干扰技术沉默CTGF有效阻断了TGF-β1诱导的腹膜间皮细胞EMT，从而证明CTGF是TGF-β1诱导腹膜间皮细胞发生EMT的重要靶点。并通过研究发现CTGF下游依靠ERK1/2及PI3-K/Akt信号传导途径诱导腹膜间皮细胞发生EMT。本项目研究结果为有效的防治胃癌的腹膜转移提供新的思路与靶点。也为腹腔其他脏器恶性肿瘤腹膜转移的防治提供了依据。本项目已按计划完成。