大叶鼠尾草中防治血管性疾病的活性成分研究

Salvia grandifolia belongs to the Lamiaceae family. The root of S. grandifolia is used as the substitute of S. Miltiorrhiza in Sichuan and Yunnan provinces in China, but the research of S. grandifolia was rarely reported.In our former research, CHCl3 and EtOAc fractions obtained from 70% EtOH extract were firstly found to have potent protection against vascular dysfunction. A total of 28 compounds were identified by HPLC-UV-ESI-MS2, which led to the isolation of two new diterpenoid tropolones and 14 known compounds got from the bioactive fractions.The result in vitro showed that one of the new compounds, grandifoliol, had strong protection against vascular dysfunction, which suggested it had potential anti-atherosclerotic effects. It could dose-dependently protect human umbilical vein endothelial cell from oxidative injuries induced by H2O2, with EC50 value of 0.011 uM/mL.The inhibitory effect of the new compound, grandifoliol, on vascular smooth muscle cell proliferation was much greater than that of positive control,tetrandrine. The new compound was already applied for a Chinese patent. In this project, the bioactivity-directed seperation, the structural modification of bioactive compounds,and structure-activity relationship study will all be carried out by our group. In addition, the best bioactive compounds in vitro will be further tested in animal models and their anti-atherosclerosis in vivo will be discussed. This project aims to obtain lead anti-atherosclerotic compounds, and provides the foundation of developing new drugs against vascular diseases.

大叶鼠尾草属于唇形科鼠尾草属，其根入药在四川和云南等地作丹参代用品使用，但未见其研究报道。本课题组首次发现其根的70%乙醇提取物的氯仿和乙酸乙酯部位具有抗血管功能损伤作用，用HPLC-UV-ESI-MS2鉴定了其中的28个化合物，并从中分离得到2个新的环庚三烯酚酮二萜类化合物及14个已知化合物。体外活性筛选结果显示其中一个新化合物大叶鼠尾醇具有良好的抗血管功能损伤作用，提示有潜在的抗动脉粥样硬化活性:其对人脐静脉内皮细胞H2O2损伤的保护呈剂量依赖性，EC50为0.011uM/mL；抑制血管平滑肌细胞增殖的效果明显优于阳性对照药粉防己碱。且该新化合物已申请专利。本课题将继续对大叶鼠尾草活性部位进行化学成分分离，结构修饰及构效关系分析，对体外活性最好的化合物进行整体动物实验，进一步评价药效，以获得防治动脉粥样硬化的先导化合物,为开发防治血管性疾病的新药打下基础。

大叶鼠尾草属于唇形科鼠尾草属植物，除本课题组以外，未见其它研究报道。.本课题组从大叶鼠尾草根70%乙醇提取物的氯仿和乙酸乙酯洗脱部分分离得到43个化合物，其中9个为新化合物。化合物类型包括环庚三烯酚酮二萜、丹参酮二萜、三萜、迷迭香酸类化合物等。.对部分新化合物进行了生源途径的推导。.对其中3个含量较高，且据报道有血管舒张作用的化合物isograndifoliol，tanshinone-IIA和 rosmarinic acid进行衍生化合成，共得到21个衍生物。.对这些化合物和衍生物进行了血管功能损伤保护的活性实验：在去甲肾上腺素和高钾模型的离体血管舒张实验中，新化合物grandifolia B和已知化合物isograndifoliol均具有中等强度剂量依赖的血管舒张作用，EC50 36.36-74.51 μg/mL。新化合物grandifolia H和5个已知丹参酮二萜类化合物具有较好的人脐静脉内皮细胞H2O2损伤保护作用，EC50 0.038-0.903 μg/mL。.醛糖还原酶抑制作用的实验中，发现15个化合物，包括8个丹参酮类（IC50 0.19- 4.70 μM）及7个迷迭香酸类化合物对醛糖还原酶（IC50 0.06 - 0.30 μM）有抑制作用,。此外，部分丹参酮二萜和迷迭香酸类化合物还具有不同程度的其它体外活性，包括保肝活性及对蛋白酪氨酸激酶的抑制作用等。.进行了初步构效关系的探讨：1）推测七元环共轭结构未被破坏的环庚三烯酚酮二萜类化合物具有较好的离体血管舒张作用。2）在醛糖还原酶抑制活性中，对于丹参酮二萜类化合物，具有C-11,12位2个羰基的丹参酮类化合物具有较好的抑制活性；对于迷迭香酸类化合物，α,β-不饱和羰基的共轭结构及酚羟基是醛糖还原酶抑制活性的必要基团，酚羟基烃基化后活性减弱，另外，迷迭香酸类化合物成苷，该活性消失。. 本课题已发表4篇论文，包括英文SCI杂志Phytochemistry （IF 2.78）, Fitoterapia（IF 2.41）, Journal of Asian Natural Product Research（IF 1.0）, 及中文核心期刊“中药材”。. 本课题已有授权专利1个“化合物大叶鼠尾醇、其制备方法及其应用 (2015, 专利号1695198)”。. 参加学术交流1次。