Treg细胞调节B细胞在子痫前期发生中的作用和机制研究

CD4+CD25+Treg（简称Treg）细胞具有独特的免疫调节功能，参与体内多种免疫细胞的调节。近期文献报道，外周Treg细胞有直接抑制或杀伤B细胞的功能，这对维持机体免疫自稳十分重要。我们前期研究发现PE患者外周血中B细胞百分比增加，且抗胎儿体液免疫增强，推测与Treg细胞对B细胞的这种调节功能减弱有关。本项目拟在前期工作基础上进行深入研究，以Treg细胞和B细胞为靶标，以同期正常晚孕对象为对照，在体研究Treg细胞和B细胞在PE中的变化关系；体外研究PE患者外周血中Treg细胞对B细胞功能的影响；同时从细胞-细胞间接触、细胞因子分泌和细胞凋亡三方面，探讨Treg细胞对B细胞的作用机制。以期明确外周血中Treg细胞调节B细胞在PE发生中的作用和机制，为临床寻找新的免疫治疗靶标和制定有效的免疫治疗策略提供思路；同时，对解析其它妊娠相关疾病、移植耐受诱导、自身免疫病的发生机理有一定的借鉴。

Treg细胞具有独特的免疫调节功能，参与体内多种免疫细胞的调节，对维持机体免疫自稳十分重要。本项目以Treg细胞和B细胞为靶标，以同期正常晚孕对象（n=40）为对照，探讨了Treg 细胞和B 细胞在子痫前期（PE） 中的数量变化关系、Treg 细胞对B 细胞功能的影响和Treg细胞凋亡的途径。首先，采用流式细胞技术检测PE患者（n=32）外周血Treg细胞和B细胞亚群百分比的变化和二者间的相关性，发现PE患者外周血Treg细胞百分比明显减少，记忆B细胞百分比明显增加，且二者呈现明显的负相关性。其次，采用免疫磁珠分选技术体外分离纯化Treg细胞和B细胞，体外研究Treg细胞对B细胞增殖功能的影响。结果显示，与同期正常晚孕妇女相比，PE患者外周血Treg细胞对B细胞增殖的抑制功能没有明显差异。这表明在PE的发生中以Treg细胞数量的变化为主，其对B细胞的抑制功能并未发生改变。最后，从细胞凋亡的角度对Treg细胞数量减少的原因进行了进一步研究。从Treg细胞对“IL-2缺乏诱导细胞凋亡” 这一凋亡途径更为敏感出发，采用免疫磁珠分选Treg细胞，预活化后，在有或无rIL-2环境下体外培养，采用Annexin V/PI凋亡试剂盒和流式细胞技术检测IL-2对Treg细胞凋亡的影响，结果显示，PE组无论在有或无rIL-2存在的情况下，Treg细胞凋亡百分比均无统计学差异，这与Treg细胞表面IL-2受体（CD25）下调导致IL-2/IL-2R路径缺陷有关。综上，本项目揭示了PE患者外周血Treg细胞数量减少而非抑制功能减弱是导致B细胞数量增加的原因之一，而IL-2/IL-2R缺陷诱导的Treg细胞凋亡增加是导致Treg细胞数量减少的原因之一。通过该项目的研究，取得一定成果：已在国际期刊AJRI上发表论文1篇（SCI收录）；参加国际学术会议交流2次（大会报告和海报交流各1次），培养硕士生2名。其它研究结果尚在整理和投递中。