采用逆转录PCR方法,分别从HL-60细胞和正常人外周血、HGV RNA阳性献血员外周血中克隆了人BPI氨基端基因BG60、BGNor和BGHGV。序列分析结果表明:BG60与文献报道一致;BGNor和BGNor各有1个和2个氨基酸变异。由此推测中国人BPI氨基端基因可能具有特殊性。利用大肠杜菌表达载体稳定表达了BPI,分子量23KD,表达量>30%,为包含体形式。经金属螯合亲和层析纯化,获得了高纯度(>90%)的目的蛋白。将之免疫BLAC/c小鼠,获得了抗人BPI的单克隆抗体细胞株。在杆状病毒-昆虫系统以及CHO细胞中分别表达了BPI氨基端蛋白。免疫印迹证实重组蛋白的特异性。体外实验表明重组蛋白具有较强的杀菌和中和LPS的生物学活性。
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数据更新时间:2023-05-31
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