慢性阻塞性肺疾病患者巨噬细胞吞噬功能缺陷机制的研究

感染是慢性阻塞性肺疾病（COPD）急性加重最常见的原因。COPD患者肺泡巨噬细胞NF-κB活化，但吞噬功能低下，其确切机制不清。本研究项目提出COPD患者因慢性气道炎症造成巨噬细胞吞噬相关受体及信号通路过度活化，致其功能耗竭而发生吞噬功能缺陷的假说。拟以COPD患者为研究对象，制备单核细胞来源巨噬细胞(MDM)作为肺泡巨噬细胞吞噬功能的研究模型，用流式细胞计数和共聚焦方法测定吞噬功能；检测吞噬前后Toll样受体(TLR)、甘露糖受体(MR)及相关信号分子CD14、MyD88、MAPK、MD2及胞内钙和PKC的含量及mRNA表达的变化，同时检测NF-κB的核转位和活化程度，阐明吞噬过程中TLR和MR及其信号通路与NF-κB的关系，揭示COPD患者巨噬细胞吞噬功能低下发生的机制；验证COPD患者巨噬细胞吞噬功能缺陷机制的假说。为改善COPD患者的吞噬功能、减少COPD急性加重奠定基础。

本项目提出COPD 患者因慢性气道炎症造成巨噬细胞吞噬相关受体及信号通路过度活化，致其功能耗竭而发生吞噬功能缺陷的假说。本项目以COPD 患者为研究对象，以单核细胞来源巨噬细胞（MDM）为研究模型，用流式细胞术和共聚焦显微镜检测吞噬功能；实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹法检测吞噬前后Toll 样受体（TLR）及相关信号分子CD14、MyD88 mRNA和蛋白的表达，细胞免疫荧光法检测NF-κB 的核转位和活化程度，阐明吞噬过程中TLR及其信号通路与NF-κB 的关系，揭示COPD 患者巨噬细胞吞噬功能低下发生的机制，为改善COPD 患者的吞噬功能、减少COPD 急性加重奠定理论基础。本研究小组经过反复多次的实验，成功建立了用外周血单核细胞培养制备MDM的方法，并用LPS、萝卜硫素、大气污染物PM2.5、香烟烟雾提取物（CSE）干预COPD患者和健康者MDM，检测各组MDM吞噬荧光标记大肠杆菌（FITC-E.coli）的能力，检测干预前后TLR2、TLR4、MyD88、NF-κB及下游炎性因子的变化。目前已在《中华结核和呼吸杂志》发表论著3篇，在《中华内科杂志》发表论文2篇，在《中华医学杂志》发表论著1篇，在《中华老年医学杂志》发表论著1篇，在《中国老年学杂志》发表综述2篇，在《国际呼吸杂志》发表综述1篇。培养硕士研究生9人。