基于多模态分子影像的抗人sApril中和抗体抑制B淋巴瘤的实验研究

增殖诱导配体(APRIL)因与多种肿瘤细胞增殖和存活以及加速肿瘤形成等密切相关而成为多种肿瘤治疗时进行药物设计的新靶点。本项目在已成功获得具有抑制sAPRIL促Raji细胞增殖作用的抗人sAPRIL中和抗体基础上，为深入探讨其体内抑制B淋巴瘤生长的效果及机制，进一步构建了萤光素酶稳定表达的Raji细胞株，并用此细胞株建立裸鼠荷淋巴瘤模型， 结合在淋巴瘤荷瘤裸鼠体表所捕获的光学数据分布，以及利用micro-CT所得到的几何解剖数据等多模态信息，使用全身快速成像技术重建肿瘤生长转移的三维模型，同时利用上述三维模型评价抗人sAPRIL中和抗体在裸鼠体内抑制肿瘤形成和在荷瘤裸鼠体内抑制肿瘤生长、转移的作用及机制。本课题率先采用分子影像研究抗人sAPRIL中和抗体在体治疗APRIL高表达相关肿瘤的疗效，旨在为抗体抑制高表达某种抗原的肿瘤治疗提供在体原位检测与实时动态评价的分子影像模型和实验依据。

有效抑制APRIL的功能活性，将为相关肿瘤的治疗提供崭新途径。本课题研究抗人sAPRIL中和抗体对裸鼠体内抑制肿瘤形成和生长、转移的影响，同时建立一种快速的生物自发光成像方法，借助多模态融合计算的手段实现在体原位实时动态评价该抗体对肿瘤的抑制效应。本项目成功克隆和表达人可溶性APRIL(soluble APRIL，sAPRIL)，经PCR构建不同的sAPRIL cDNA缺失突变体(mutant sAPRIL cDNA，msAPRIL cDNA)，然后将各msAPRIL cDNA分别与鸡卵清溶菌酶(hen egg-white lysozyme，HEL)Th表位DNA序列重组并克隆于原核表达载体，制备由msAPRIL和HEL Th表位组成的融合蛋白并证实相应融合蛋白已丧失了正常sAPRIL的功能活性，通过融合蛋白免疫正常小鼠和以人外周血单个核细胞重建免疫功能的裸鼠，获得抗人sAPRIL抗体，并证实相应抗体对人sAPRIL促Raji细胞增殖的抑制作用；建立了淋巴瘤自发荧光荷瘤裸鼠模型、经自主研发的Optical/micro-CT多模态影像系统光学成像系统对抗体治疗肿瘤效果进行检测评价，利用构建的激发荧光断层成像算法计算淋巴瘤在体生长的三维分布，运用广义图割成像方法重建淋巴瘤在体生长的三维分布，通过三维影像重建，发现抗人sAPRIL中和抗体能明显抑制裸鼠体肿瘤生长和转移，在动物模型上证明抗人sAPRIL中和抗体能抑制B淋巴瘤的生长；同时提出一种针对淋巴瘤基于广义图割的生物自发光断层成像方法，和一种针对淋巴瘤用于光学在体成像的多模态信息融合方法。