粪肠球菌所致根尖周炎和感染性心内膜炎的相关性初探

Apical periodontitis is one of the most common oral diseases. The relationship between periodontitis and systemic disease has been increasing recognized over the past decades. However, research is limited on the relationship between apical periodontitis and systemic disease. In consideration of the similarity of periodontitis and apical periodontitis in many aspects such as osteolytic destruction in chronic phrase, it is speculated that chronic apical periodontitis might affect general health of patient via interaction between bacterial virulence and host immune system..Enterococcus faecalis (E. faecalis), the main pathogenic bacteria of persistent apical periodontitis, was observed in 77% obturated root canals in teeth with chronic apical periodontitis in previous study. Currently, with the widespread administration of antibiotics, E. faecalis has emerged to be one of the most important pathogens of Infective endocarditis(IE).It also has been confirmed that dental procedure is risk factor of IE. In view of that both apical periodontitis and IE are microbial infection diseases, it is assumed that there might be a relationship between these two..The objective of our study is to explore possible underline pathological mechanisms and the relationship between these two diseases by establishing animal models of rat for persistent apical periodontitis and IE with subsequent detection of related blood and organ indices.

根尖周炎是一类危害人类口腔健康的常见病，近年有关牙周病与全身健康的关系正逐步被接受，而根尖周炎与全身健康的关系尚无定论，相关研究甚少。鉴于慢性根尖周炎与牙周炎在许多方面的相似性，如均可表现为溶骨性破坏等，推测慢性根尖周炎也可通过细菌毒力破坏以及宿主自身免疫反应而影响全身健康。.慢性根尖周炎中的难治性根尖周炎，粪肠球菌在其中的检出率高达77%，被认为是导致难治性根尖周炎的主要细菌。而目前已证实粪肠球菌也是临床引起感染性心内膜炎（IE）的重要病原菌。既然二者都是以粪肠球菌为主要致病菌的感染性疾病，且已有研究发现牙科治疗是IE的风险因素。因此，设想这两种疾病是否会相互影响，或存在一定的关系。. 本项目通过构建SD大鼠粪肠球菌感染慢性根尖炎与IE模型，检测血液及各器官的相关指标，探索两种感染性疾病之间的关系，探讨其发病的可能病理生理机制，初步探索根尖周炎与全身健康的关系。

本研究已按预定方案完成基本目标，目前已培养毕业硕士研究生2名，参加“第四次全国牙体牙髓病临床学术研讨会”小组交流论文1篇，壁报交流1篇；完成并投稿论文2篇。. 具体如下：本研究通过髓腔开放、根管预备消毒及之后导入粪肠球菌菌悬液构建SD大鼠粪肠球菌再感染根尖周炎模型，在建模过程中通过HE染色，TNF-α、IL-1β和MMP-8免疫组化染色，以及扫描电镜观察等方法检测建模成功。HE显示再感染1至3周炎症十分明显，实验牙根尖周组织均呈重度急性炎症状态，且伴出血和骨吸收现象；在4周时转为中度炎症；4周到6周炎症细胞均逐渐减少，炎症细胞散在浸润。免疫组化显示：TNF-α在粪肠球菌再感染1周时即高表达，表达量从1周上升至2周达高峰；IL-1β从1周上升至3周达高峰；MMP-8从1周开始不断上升至6周。TNF-α与IL-1β在再感染一周时的高表达侧面反映了建模的成功，而这三个细胞因子由于其发挥作用的不同，因此可见在同一个炎症反应中它们变化趋势的明显差异。通过扫描电镜观察发现大鼠慢性根尖周炎模型中细菌可定植于根尖外表面形成根尖生物膜，粪肠球菌再感染根尖周炎可形成结构致密的成熟根尖生物膜。 .　　　在建模过程中对cyl基因进行荧光定量PCR检测，探索cyl基因在粪肠球菌再感染根尖周炎中的机制作用。Cyl可促进TNF-α、IL-1β及MMP-8的表达，以增强对根尖周组织的破坏，促进根尖周炎症的扩展，尽管它并不是调控这三种因子表达的唯一因素。因此溶血素虽不是炎症进展的决定因素，但可降低粪肠球菌再感染根尖周炎炎症的自愈性，延长炎症进程。. 同时研究了大鼠粪肠球菌再感染根尖周炎模型对大鼠全身状况的影响，检测血液和部分脏器的相关指标（包括细菌培养、细胞因子检测、组织病理检测），探索慢性根尖周炎，尤其是粪肠球菌再感染根尖周炎与全身健康之间的相关性，并探讨其可能的病理生理机制。粪肠球菌再感染根尖周炎可引起一过性菌血症，同时粪肠球菌可短暂停留在肝脏和脾脏中；同时也影响大鼠血清中细胞因子IL-2、IL-6和CRP的表达水平。粪肠球菌再感染根尖周炎致主动脉弓、心肌、肝脏和脾脏的炎性改变，且在主动脉弓和肝脏中改变较明显，如：炎症细胞的边集、黏附甚至侵入血管内膜；肝细胞的水肿，肝索排列紊乱，甚至肝细胞坏死等组织病理改变。