大麻素CB2受体：巨噬细胞efferocytosis功能调控和不稳定斑块防治的新靶点

内源性大麻素（Endocannabinoids）系统最近在动脉硬化疾病研究方面引起了广泛兴趣。研究表明，大麻素CB2受体激动剂具有抗炎、抗氧化和缩小斑块等作用。新近证实，巨噬细胞对凋亡细胞清除（Efferocytosis）能力受损引起斑块内凋亡细胞堆积过多是不稳定斑块形成和进展的重要原因。国外研究和我们的前期工作均表明，CB2受体激活对巨噬细胞Efferocytosis功能具有潜在的正性调控作用。我们推测：CB2受体激活可能使巨噬细胞Efferocytosis功能增强，从而使斑块内凋亡细胞清除增加，对不稳定斑块的形成和进展将产生潜在的防治作用。本项目在前期工作基础上，拟从细胞培养和动物实验水平，研究大麻素CB2受体激活对巨噬细胞Efferocytosis功能的调控及其机制，同时观察CB2受体激动剂治疗对粥样硬化不稳定斑块的影响，为进一步设计和开发新的抗动脉硬化靶点提供初步的理论和实验依据。

冠状动脉粥样硬化斑块的不稳定和破溃是引起急性冠状动脉事件和冠心病致死致残的重要原因和关键机制之一。越来越多的证据表明，动脉粥样斑块内凋亡细胞堆积过多以及巨噬细胞对凋亡细胞吞噬性清除(efferocytosis)能力不足是不稳定斑块形成和进展的重要原因。最近研究发现，内源性大麻素（Endocannabinoids）系统及其受体除参与心血管代谢危险因素调节作用外，对氧化炎症效应、斑块进展、缺血再灌注损伤等多种心血管疾病过程均产生十分重要的调节作用，但是对巨噬细胞的efferocytosis功能是否也具有调控作用，目前还未见相关文献报道。..本研究以体外培养的小鼠RAW264.7巨噬细胞株和原代分离的C57BL小鼠腹腔灌洗原代巨噬细胞为对象，给予不同浓度的大麻素CB2受体激动剂干预。采用流式细胞分析和激光共聚焦显微镜方法测定巨噬细胞efferocytosis功能，细胞分子生物学方法检测大麻素CB2受体激动剂调控巨噬细胞efferocytosis功能的可能的分子机制。..我们研究发现：.（1）氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）可降低RAW264.7巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬（efferocytosis），其机制与下调巨噬细胞促吞噬受体Mertk基因和蛋白的表达有关。.（2）我们在国内外首次发现大麻素CB2受体激动剂JWH133和HU308对体外培养的正常和OxLDL脂质负载的RAW264.7巨噬细胞株和原代分离的C57bl小鼠腹腔灌洗巨噬细胞的efferocytosis功能具有促进作用，其机制与上调巨噬细胞的促吞噬受体MerTK, Tyro3 和Axl的表达和抑制Rho GTP酶介导的氧化炎症反应有关。.（3）此外，我们还证实在急性心肌梗塞和心肌缺血再灌注损伤时内源性系统存在激活，CB2受体激动剂可降低梗死面积、降低氧化炎症反应，对急性梗死和缺血再灌注损伤的心脏具有保护作用。..结论：（1）氧化型低密度脂蛋白降低巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬，这可能是不稳定斑块形成和进展的重要原因；（2）CB2受体激动剂使正常和氧化脂质负载的巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬性清除能力显著提高，对梗死和缺血再灌注损伤的心脏也具有明显的保护作用。提示靶向于大麻素CB2受体可能为冠状动脉粥样硬化的治疗提供新的洞察力。