Vav1/Rac通路在肿瘤浸润CD8+T细胞活性调控中作用机制的研究

Tumor-induced immunosuppressive environment can help the tumor to escape the immune surveillance and promote tumor growth. Study of the mechanism of disable local tumor infiltrating T lymphocytes to correct the immune status of the local tumor is of great significance. Our preliminary research suggests that the key element-Vav1 in TCR signal transduction pathway in tumor-induced CD8+T-cell activity plays an important role, and we have examined the mechanism of Vav1's non-GEF-dependent pathway in tumor infiltrating CD8+T lymphocytes.However,the specific mechanism of Vav1's GEF activity in tumor infiltrating CD8+T lymphocytes is unclear. In this project, firstly, we estimate the activities through the detection of proliferation, ability of killing and secretion of cytokines of tumor infiltrating CD8+T cells. Then we assess the Vav1 expression. We choose the tumor infiltrating CD8+T lymphocytes of low activity. To explore the specific mechanism of Vav1 regulating CD8+T cell activity, we detect the Vav1/Rac pathway for T-cytoskeleton regulation, as well as the expression of early T cell signaling molecules and their activities. On one hand, this study proposes the possible mechanisms of local tumor CD8+T lymphocyte function changes; on the other hand, we hope to find an approach to regulate local tumor CD8+T lymphocyte function, in order to find new therapeutic targets.

肿瘤微环境局部浸润的T淋巴细胞活性常处于抑制状态，其机制的研究对于纠正肿瘤局部的免疫状况，具有重要意义。我们前期对于T细胞亚群的研究提示CD8+T细胞中TCR信号传导途径中的关键分子Vav1在其活性调控中具有重要的作用，并探讨了Vav1通过非GEF依赖通路调控肿瘤浸润CD8+T细胞的机制，但对于Vav1的另一重要功能—GEF活性在CD8+T细胞中的具体作用机制目前尚不明确。在本项目中首先在前期基础上扩大样本检测肿瘤局部浸润CD8+T细胞增殖、杀伤及分泌细胞因子的能力，和Vav1的表达，并通过检测失活CD8+T细胞中Vav1/Rac通路对于T细胞骨架的调控作用，以及T细胞早期信号传导分子的表达和活化情况，探讨Vav1调节CD8+T细胞活性的具体机制。通过本研究一方面可以提出肿瘤局部CD8+T淋巴细胞功能变化的可能机制；另一方面，探索调控肿瘤局部CD8+T淋巴细胞功能的方法，从而寻找新的靶点。

在肿瘤微环境局部浸润的T淋巴细胞活性常处于抑制状态，其机制的研究对于纠正肿瘤局部的免疫状况，具有重要意义。研究表明，在肿瘤微环境中，存在着多种可以导致肿瘤局部免疫耐受发生的因素。可以使细胞毒性T淋巴细胞数量和功能都明显低下，形成了肿瘤局部的免疫耐受，不仅导致肿瘤进展加快，同时也是造成各种免疫治疗措施无效的主要原因。其机制尚不十分清楚。CD8+T细胞，俗称CTL，为T细胞亚群中功能较为重要的一群，是肿瘤微环境中抗肿瘤免疫的重要防线。Vav1是该T细胞中重要的信号传导分子之一。本研究观察了原位肿瘤浸润CD8+T淋巴细胞(CD8+ TIL-T)中Vav1的表达情况和肿瘤局部免疫抑制的关系。对原位CD8+ TIL-T的研究结果发现：1.肿瘤局部浸润的T细胞处于功能抑制状态，在我们的研究中发现，这种抑制状态可能与细胞内重要的信号传导蛋白Vav1相关。研究发现增殖活性不同的TIL-T，其Vav1的表达亦存在差异。Vav1低表达的标本中，TIL-T表现为对活化刺激信号的反应性低，增殖能力差。2） 部分肺癌局部浸润的T细胞处于功能抑制状态， 这种抑制状态可能与细胞内重要的信号传导蛋白Vav1的表达量及活性相关。Vav1的表达和活化在TIL-T功能中具有重要的作用。3） Vav1的表达下调，导致其下游分子Rac蛋白表达受损，肌动蛋白细胞骨架重组缺陷，以致T细胞不能有效形成脂筏结构，从而不能正确启动TCR信号转导，以致T细胞功能受损。本研究考察了Vav1蛋白对肿瘤浸润T淋巴细胞功能的影响，以全面深化对Vav1与肿瘤局部T细胞活性之间关系的认识，揭示T细胞低活性状态产生的原因，为寻找治疗肿瘤的新的靶点提供新的思路。Vav1在肿瘤浸润T细胞中的表达状况及与其功能关系的研究国内外尚未见报道。