生地炭、熟地炭止血炮制机理研究

本项目选择河南道地药材四大怀药之一的地黄及其炮制品熟地黄，两者炒炭后的炮制品即生地炭和熟地炭作为研究对象。研究生地炭和熟地炭止血炮制机理及其止血药效学作用物质基础。课题将分别从整体动物、细胞及分子水平等三个层次以及对体内吸收代谢过程的考察进行生地炭和熟地炭止血炮制机理的研究，通过测定各种凝血因子及相关酶的活性探讨其作用机制，并结合活性成分分离及生物色谱技术进行谱效关系的研究，全方位揭示生地炭和熟地炭止血的炮制机理，并在此基础上选取血热型出血模型和血虚型出血模型对生地炭和熟地炭止血炮制机理进行初步的比较研究。

一、项目完成情况. 本项目分别对生地炭和熟地炭止血炮制机理及其止血药效学作用物质基础进行研究，为揭示中药炒炭炮制的科学内涵、扩大地黄炮制品在中医临床的应用范围、并为临床上合理有效利用生地炭和熟地炭提供一定的理论依据。对照任务书中的研究目标，实验内容现全部完成。即：.（1）筛选出生地炭、熟地炭制炭最佳的炮制工艺。.（2）制定了生地炭、熟地炭饮片质量标准（草案）。.（3）建立了生地黄及生地炭、熟地黄及熟地黄炭饮片HPLC指纹图谱，可用来鉴别和控制生地黄及生地炭饮片，熟地黄及熟地炭饮片的质量和炮制程度。.（4）探讨了生地炭、熟地炭止血作用机理。.（5）分别建立血热出血、血虚出血的病理模型，并在此病理模型的基础上初步探讨了生地炭凉血止血、熟地炭补血止血作用机制。. 本项目执行期间，在国内外学术核心刊物上发表高质量的学术论文10篇，超额完成任务书中既定目标。项目负责人晋升为副教授，联合培养了2名硕士研究生, 培养了7名本科毕业生其中3人毕业论文评为优秀毕业论文。.二、研究成果概述.（1）生地炭. 生地制炭最佳工艺为240℃炒15min；生地炭中总多糖含量比较结果为：生地（17.3 %）>生地炭（7.22 %）；毛蕊花糖苷含量比较结果为：生地（ 0.045 %）>生地炭（0.022 %）；梓醇含量比较结果为：生地（0.068 %）>生地炭（0.020 %）。 制定了生地炭质量标准草案，规定生地炭中毛蕊花糖苷不得少于0.022 %，梓醇不得少于0.020 %。筛选出生地炭止血主要活性部位为生地炭水煎液组，生地炭及其生地炭水煎液均可缩短大鼠PT、 TT、APTT，提高FIB含量和血小板聚集率。.（2）熟地炭. 熟地制炭工艺为200℃烘20min；熟地制炭前后总多糖糖含量比较结果为：熟地黄3.328mg/g > 熟地炭1.886 mg/g；毛蕊花糖苷含量比较结果为：熟地黄0.024% > 熟地炭0.013%；5-羟甲基糠醛含量比较结果为：熟地炭0.319% > 熟地> 熟地黄0.169%。筛选出熟地炭止血主要活性部位为水部位，熟地炭及其水部位均可缩短正常大鼠PT、TT、APTT，降低FIB含量，提ADP诱导的血小板聚集率；对于血虚出血模型大鼠，发现熟地炭及其水部位均可缩短大鼠PT、TT、APTT，降低FIB的含量。