化痰活血方通过IL-13信号通路干预哮喘模型MUC5AC分泌的机制研究

Airway mucus hypersecretion is one of the main reasons in mortality of asthma. The MUC5AC is the representative of mucus proteins, which is synthesized by proliferated goblet cells in asthma disease.The current study showed that IL-13(Interleukin 13，IL-13) signaling pathway plays a critical role in mucus hypersecretion of asthma. In Chinese Traditional Medicine theory, the phlegm and blood stasis is an crutial cause for asthma.Our previous study indicated that Hua-Tan-Huo-Xue Formula significantly suppressed IL-13 and MUC5AC secretion in asthma model. In this study, to explore the molecular mechanisms of Hua-Tan-Huo-Xue Formula on MUC5AC secretion, some technologies and methods will be used, such as immunohistochemistry, western blot, ELISA, real-time quantitative PCR,confocal laser, co-immunoprecipitation and dual luciferase reporter gene assay. The intensive studies on the molecular mechanisms of regulating MUC5AC secretion in Hua-Tan-Huo-Xue Formula and its active ingredient will provide new ideas and scientific evidence, which will have important clinical significance and potential value of new drug development.

气道黏液高分泌是导致重症哮喘患者较高病死率的重要原因之一，其病理基础是增生的气道杯状细胞合成了大量以MUC5AC为代表的黏蛋白，而IL-13介导的信号通路在这一过程中具有特异而重要的作用。中医学认为“痰瘀互结”是哮喘发病的重要原因，我们在前期研究发现“化痰活血方”能够明显抑制哮喘模型动物中IL-13和黏蛋白MUC5AC的生成，但对该方如何通过IL-13通路中的各分子或途径发挥作用的具体机制尚不详，因此，本课题将在此基础上，拟通过体内及体外模型，以IL-13介导的信号通路为核心，利用免疫组化、蛋白印迹、酶联免疫吸附实验、实时定量PCR、激光共聚焦、免疫共沉淀、双荧光素酶报告基因等技术方法，研究化痰活血方调控MUC5AC生成的分子机制，探寻其可能的作用分子或途径，为哮喘的防治提供新的思路和科学理论依据，具有重要的临床意义和潜在的药物研发价值。

气道黏液高分泌是导致重症哮喘患者较高病死率的重要原因之一，其病理基础是增生的气道杯状细胞合成了大量以MUC5AC为代表的黏蛋白，而IL-13介导的信号通路在这一过程中具有特异而重要的作用。中医学认为“痰瘀互结”是哮喘发病的重要原因，我们在前期研究发现“化痰活血方”能够明显抑制哮喘模型动物中IL-13和黏蛋白MUC5AC的生成，但对该方如何通过IL-13通路中的各分子或途径发挥作用的具体机制尚不详，因此，本课题在此基础上，通过体内及体外模型，以IL-13介导的信号通路为核心，利用免疫组化、蛋白印迹、酶联免疫吸附实验、实时定量PCR、激光共聚焦、免疫共沉淀、双荧光素酶报告系统等技术方法，研究了化痰活血方调控MUC5AC生成的分子机制，主要结果如下：在动物实验中化痰活血方及其有效成分梓醇能下调MUC5AC基因和蛋白的表达，并能抑制哮喘小鼠肺组织中IL-13、IL-4Rα、Phospho-IL-4Rα、IL-13Rα1、Phospho-IL-13Rα1、Gab2、Phospho-Gab2蛋白的表达，能上调FOXA2蛋白的表达；细胞实验，化痰活血方含药血清可抑制16-HBE中MUC5AC的蛋白表达；双荧光素酶报告系统结果显示化痰活血方含药血清可下调16-HBE中MUC5AC的报告基因。