雌激素受体信号通路调控肝纤维化发生的一种新型共调节因子

肝炎病毒相关性重大肝病发生存在显著性别差异，雌激素受体（ER）在其中发挥重大作用。肝纤维化是重大肝病发生的必经环节，而结缔组织生长因子（CTGF）是参与肝纤维化发生的重要蛋白分子。我们前期工作发现CTGF与ER存在显著相互作用，故推断CTGF与ER相互作用可能是肝纤维化直至重大肝病发生的一条新型信号通路。本项目的开展对阐明肝纤维化发病机理、确立诊断指标和药物靶标具有重要意义。利用GST pull-down和免疫共沉淀技术进一步证实CTGF和ER存在相互作用并确立两者相互作用的区域；利用激光共聚焦显微镜进行ER和CTGF共定位；利用含雌激素反应元件的荧光素酶报告基因检测CTGF对ER介导的转录活性的影响及其作用部位；确定CTGF对ER作用的下游靶标及其作用的分子机制；利用染色质伸展技术检测CTGF与ER相互作用对染色质结构的影响。利用裸鼠验证CTGF在肝纤维化发生过程中的生物学特性。

肝纤维化是重大肝病发生的必经环节，而结缔组织生长因子（CTGF）是参与肝纤维化发生的重要蛋白分子。本研究中，我们首次证明结缔组织生长因子（CTGF）与ER存在物理上和功能上的相互作用。实验结果表明，CTGF和ER在体外和体内均存在相互作用：CTGF主要作用于ER的DNA结合结构域，而ER则结合于CTGF的血小板反应蛋白I型重复序列结构域。进一步研究证实，过表达CTGF能够抑制ER的转录活性以及包括PS2和CathD在内的下游雌激素应答基因的表达。靶向CTGF的小干扰RNA减少内源性CTGF表达后能够增强ER的转录活性。CTGF和ER之间的相互作用是CTGF抑制雌激素应答的转录抑制的必须条件。随着深入研究发现，CTGF可以抑制ER蛋白的表达，而没有抑制ER转录活性的结缔组织生长因子突变体也不能改变ER蛋白水平。上述种种研究结果表明，CTGF和ER之间的相互作用是调控着雌激素信号通路的基础，而这种调控作用为深入了解分泌型生长因子之间与ER信号径路间的串话（cross-talk)提供了一种新的分子机制。