苦菜降解尼古丁有效成分的分离鉴定及其作用机理研究

目前全世界约有11亿吸烟者，每年约有540万人死于由烟草引起的疾病。我国是烟草生产和消费大国，如何降低烟草中尼古丁含量,减轻其对人体健康的危害是需要迫切解决的社会问题。申请人在前期的研究中发现，苦菜中的白色浆液可以降低烟草中的尼古丁含量，但其有效成分和降解尼古丁的机理还不清楚。本项目拟以苦菜（Ixeris chinensis）为试验材料，先用乙酸乙酯等不同极性溶剂萃取苦菜中各极性部位成分，将其和尼古丁作用后确定有效极性部位；再用层析分离技术分离有效极性部位中各种成分，将分离到的各种成分和尼古丁作用确定有效作用成分；用制备液相色谱纯化有效成分，采用熔点分析、波谱分析等方法鉴定其分子结构；采用LC-MS法跟踪检测有效成分与尼古丁的反应产物，对其反应过程进行动力学分析，从而推断有效成分与尼古丁作用的途径，揭示其作用机理，为苦菜降解尼古丁在烟草工业中的应用提供理论和试验依据。

目前全世界约有11亿吸烟者，每年约有540万人死于由烟草引起的疾病，如何减轻烟草其对人体健康的危害是需要迫切解决的社会问题。烟草中的尼古丁是一种中枢神经兴奋剂，提供卷烟吸食时的烟味、劲头和生理满足感，使人的心理和生理产生依赖性，是吸烟成瘾的决定性因素；尼古丁还是烟草和烟气中主要致癌成分亚硝胺(TSNA)的前体，长期吸烟的人易患肺癌。因此，抑制尼古丁的毒性作用是使人远离烟草、实现控烟的根本途径。.本项目研究了苦菜降解尼古丁的作用及有效成分，揭示了苦菜抑制尼古丁毒性作用的途径和机理。.（1）研究了苦菜中具有降解尼古丁作用的有效极性部位。分别采用极性依次增大的溶剂石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、水萃取苦菜，得到苦菜的不同极性提取部位；以尼古丁的含量变化为指标，分析不同极性提取部位对尼古丁的降解效果。实验结果表明，苦菜的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、水提取物对尼古丁的含量基本没有明显影响，而苦菜的正丁醇提取物与尼古丁作用后，使其含量降低了28.5%。因此，确定了苦菜的醇提物为降解尼古丁的有效极性部位。.（2）研究了苦菜中降解尼古丁有效极性部位中的有效成分。采用硅胶柱层析分离苦菜降解尼古丁的有效极性提取部位，分别以极性梯度递增的洗脱剂氯仿-甲醇洗脱；以尼古丁的含量变化为指标，分析不同极性洗脱馏分对尼古丁的降解效果。实验结果表明，洗脱剂氯仿比例较大、极性较小时，对尼古丁没有明显的影响；当洗脱剂为纯甲醇时，尼古丁含量降低了25.7%。通过定性鉴别试验初步判断，甲醇洗脱馏分为黄酮类化合物，苦菜降解尼古丁的有效成分可能为黄酮类化合物木犀草素、芹菜素及其糖苷。.（3）研究了苦菜中有效成分抑制尼古丁毒性作用的途径，揭示了其作用机理。以小鼠血清乙酰胆碱为评价指标，通过动物实验研究了苦菜醇提物对小鼠尼古丁中毒的拮抗作用。实验结果表明，苦菜对小鼠尼古丁急性中毒有一定的拮抗作用，其途径是通过抑制神经递质乙酰胆碱的释放来实现尼古丁神经毒性作用的减弱。尼古丁作用于烟碱型乙酰胆碱受体，使其突触传递增强，从而促进神经递质释放，引起小鼠中毒。而苦菜具有抑制尼古丁的神经毒性作用，可以有效缓解对烟草的成瘾依赖性。.本项目研究分离、鉴别了苦菜降解尼古丁的有效成分，揭示了苦菜抑制尼古丁毒性作用的途径和机理，在国内、国际期刊发表论文4篇，培养硕士研究生2名、博士后1名，完成了本项目的研究目标。