重组人杀菌蛋白氨基端生物学活性及杀菌机理的研究

采用逆转录PCR方法，分别从HL-60细胞和正常人外周血、HGV RNA阳性献血员外周血中克隆了人BPI氨基端基因BG60、BGNor和BGHGV。序列分析结果表明：BG60与文献报道一致；BGNor和BGNor各有1个和2个氨基酸变异。由此推测中国人BPI氨基端基因可能具有特殊性。利用大肠杜菌表达载体稳定表达了BPI，分子量23KD，表达量>30%，为包含体形式。经金属螯合亲和层析纯化，获得了高纯度（>90%）的目的蛋白。将之免疫BLAC/c小鼠，获得了抗人BPI的单克隆抗体细胞株。在杆状病毒-昆虫系统以及CHO细胞中分别表达了BPI氨基端蛋白。免疫印迹证实重组蛋白的特异性。体外实验表明重组蛋白具有较强的杀菌和中和LPS的生物学活性。