建立穿梭质粒/转基因小鼠突变检测系统的实验研究

本研究采用显微注射法将带有突变靶基因1acI的PSPORT1质粒导入小鼠受精卵，由此建立了8个相应的转基因小鼠家系，并对其中的D6-2小鼠家系在诱变上的应用进行了验证研究。还建立了从基因组DNA中回收PSPORT1质粒的方法以及一种基于M9/L培养基的在体外正向选择1acI突变子的系统。研究结果表明：（1）整合于该小鼠基因组DNA中的PSPORT1质粒能被有效地回收出来，在体外筛选1acI质粒能被有效地回收出来，在体外筛选1acI靶基因突变子；（2）转基因小鼠是一个低自发突变系统，适用于诱变研究；（3）EMS是在D6-2转基因小鼠骨髓组织细胞内诱发的主要突变类型是颠换突变，不同于EMS在体外检测系统中主要是诱导GC→AT转换突变的突变谱。