M1TRI1介导的miR-194纳米复合物的构建及其抗转移性黑素瘤的作用研究

As the deadliest form of skin cancer, malignant melanoma is high malignant degree and easy to metastasis. There is no efficient treatment option available for patients with metastatic disease. M1TRI1 was designed and synthesized with the characteristics of high specificity, selectivity and affinity coupling with the death receptor 5 of malignant melanoma cell. It also can efficiently induce the apoptosis of tumor cells without any toxic side effects on normal cells. This project selected the aptamer M1TRI1 as target head, biodegradable stearylated peptide (H3R5) as the carrier, wrapping anti-metastasis gene drugs miR-194, to build M1TRI1- H3R5-PEG / miR-194 targeted nanometer administration system, and to elucidate its mechanism of regulation of invasion and migration, intracellular transporters, degradation mechanisms and in vivo distribution characteristics. This study could provide a new research route for the therapy of metastatic melanoma as well as the targeting immunotherapy for other cancers.

恶性黑素瘤（MM）恶性度高和极易转移，目前缺乏有效“靶向杀伤，抑制转移”的治疗手段。本课题组设计并合成了死亡受体DR5的配体M1TRI1，可与MM细胞表面特异性结合并诱导其凋亡。再以M1TRI1为靶向头基，利用可细胞内降解的硬脂酰多肽聚合物（H3R5）作为载体，包裹抑制MM侵袭转移的基因药物miR-194，构建了肽适体M1TRI1-载体H3R5-PEG（载miR-194）[M1TRI1-H3R5-PEG/miR-194]纳米给药系统，并探讨其对MM侵袭转移的调控作用、细胞内转运降解机制及体内分布特征。通过本课题研究，将为基因靶向治疗转移性MM开辟新途径，为肿瘤生物治疗药物的递药系统设计提供新的理论依据和方法。

恶性黑色素瘤（MM）因恶性度高和极易转移，导致临床预后差，死亡率极高，而基因药物展现出较高的MM治疗潜力，其中miR-194已被证实可以有效抑制MM转移，因此，本课题为构建基于该基因的新型靶向纳米给药系统，以与MM细胞表面死亡受体DR5特异性结合、兼可诱导MM细胞凋亡的靶向凋亡适体DR5-TAT为靶向头基，再以聚酰胺胺（PAMAM）为载体，双功能聚乙二醇（NHS-PEG-MAL）为桥接，构建能够同时实现“靶向杀伤”与“抑制转移”两个抗MM治疗目标的新型靶向纳米给药系统DR5-TAT-PEG-PAMAM/miR-194，并阐明该给药系统诱导MM细胞凋亡、抑制MM细胞转移的体外抗肿瘤效果，评价其体内药效与安全性。研究结果显示，该纳米复合物粒径为122.63 ± 9.56nm，zeta电位为16.46±1.38mV，呈正电性，容易被细胞摄取，DR5-TAT修饰的纳米复合物对高表达DR5的MM细胞A375的转染效率、生长、粘附及转移的抑制作用均明显高于未修饰的纳米复合物。通过构建黑色素瘤裸鼠移植瘤模型，考察该纳米复合物DR5-TAT-PEG-PAMAM/miR-194的体内抗MM疗效及安全性，证实纳米复合物既具有抗肿瘤活性，又无明显的肝肾功能损伤及血液学异常表现，是较化疗药物更加安全的新型基因治疗药物。通过本课题研究，为MM的靶向基因治疗开辟一条新途径，同时也为其他肿瘤的基因治疗和靶向治疗提供相关的研究方法和新的研究思路。