维甲酸诱导基因蛋白I调控B细胞及Tfh细胞功能发育参与系统性红斑狼疮发病的效应及机制研究

Immunological pathogenesis of SLE, especially abnormal development of B cells and their antibody production, has been a hot spot of clinical immunology for decades. Although significant progress on the roles of helper cells and regulating factors related to B cell development in SLE progress has been made, the function of RNA sensor RIG-I in SLE is still unclear. Our experiments showed that lack of RIG-I expression in either B cells or CD4+ T cells led to a reduction of autoantibody production in SLE mouse models. Completely knockout of RIG-I caused the developmental disorder of Tfh and GC B cells and a reduced number of plasma cells. So we speculate that RIG-I may promote the pathogenesis of SLE by regulating the differentiation and function of B cells and Tfh cells. This study will focus on the effects of RIG-I expression on the development, activation, proliferation and antibody producing function of B cells, the generation and migration of Tfh cells, Tfh-B cell crosstalk and GC formation. By studying the regulation of signaling pathways and important regulating factors related to B-cell or T-cell differentiation and activation by RIG-I as well as the interaction of intracellular proteins, we can clarify the mechanisms of RIG-I in promoting SLE pathogenesis, and can provide new insight into the immunotherapy study of SLE.

SLE的免疫发病机制，尤其是B细胞异常发育及自身抗体形成机制一直是免疫学研究的热点课题。虽然对于B细胞发育和活化的辅助细胞和调控分子在SLE发病中的研究近年来取得了显著进展，但对参与RNA识别和降解、具有广泛免疫学效应的RIG-I在其中的作用研究刚刚起步。本课题组发现体内B细胞或CD4+T细胞RIG-I表达缺失均能降低SLE小鼠自身抗体分泌，RIG-I基因全敲造成小鼠脾脏Tfh和GC B细胞发育障碍，并导致浆细胞数量下降，故我们推测RIG-I可能调控B细胞和Tfh细胞的发育和功能参与SLE发病。为此，本研究将分析RIG-I在B细胞发育活化扩增和抗体分泌，及在Tfh细胞发育迁移、GC形成、T-B相互作用中的调控效应，通过研究RIG-I对B和T细胞发育活化的信号通路及关键分子的调控，以及胞内蛋白相互作用，探索分子机制，阐明RIG-I在SLE发病中的调控机制，为研究SLE治疗新靶点提供新思路。

免疫系统是机体应答外界刺激的主导者，如何从免疫细胞与分子角度阐明自身免疫病、肿瘤等免疫相关疾病的发生，是生物医学面临的重要科学问题。B细胞是机体最重要的免疫细胞之一，深入研究B细胞活化、功能及其参与免疫性疾病发生的机制具有重要的理论和应用价值。. 本项目围绕RIG-I对B细胞活化及功能的调控作用以及RIG-I对Tfh细胞和浆细胞形成的调控效应展开深入研究，在三个方面取得了重要成果：①RIG-I mRNA及蛋白表达随B细胞发育及活化逐步上升；相比野生型小鼠，RIG-I-/-小鼠外周FO B细胞、浆细胞比例和炎性因子分泌被显著抑制；RIG-I表达增强NF-κB通路活化从而促进B细胞活化； RIG-I缺陷抑制ALD-DNA诱导的SLE小鼠模型体内自身抗体的产生，而回输RIG-1+/+ B细胞能促进ALD-DNA诱导的致病性自身抗体的产生；相比野生型小鼠，RIG-I-/-小鼠外周Tfh细胞、GC B细胞和脾脏IgM+、IgG+浆细胞比例较野生型小鼠显著下降；以上揭示了RIG-I能调控B细胞活化及功能，并通过Tfh细胞调控浆细胞的形成，参与SLE发病。②发现了miR-221在骨肉瘤组织及骨肉瘤细胞系中高表达，能促进骨肉瘤细胞侵袭、迁移、扩增，及骨肉瘤细胞的化疗耐药性；miR-221是通过直接结合PPP2R2A的3’-UTR区，抑制PPP2R2A表达，抑制顺铂诱导的骨肉瘤细胞凋亡，从而揭示了miR-221在骨肉瘤的生物治疗中的潜在价值。③综述了B细胞发育不同阶段的特征性表观遗传学改变，讨论了转录调控与表观调控网络的相互作用，总结了B细胞相关疾病发病的表观遗传风险因子。. 本项目的主要特色是①发现了RIG-I调控B细胞活化及功能及通过Tfh细胞调控分泌自身抗体的浆细胞的形成的功能及机制，②揭示了miR-221在骨肉瘤进展及肿瘤耐药中的作用及机制，为自身免疫病和肿瘤的生物治疗提供了新思路。