神经调节蛋白1改善非酒精性脂肪性肝病的作用及机制研究

Nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD) is an emerging chronic liver disease. However, the underlying mechanisms remained poorly understood. NRG family participate in energy metabolism, and might be related to NAFLD. Our preliminary studies revealed NRG1 could inhibite the steatosis of NAFLD cells, improve ErbB3 phosphorylation, the expression of PI3K and phosphorylation-AKT. Therefore, we speculate NRG1 may play a protective role in the pathogenesis of NAFLD through ErbB3 signaling by the PI3K-AKT pathway. The current study intends to investigate the roles of NRG1 up-regulating ErbB3 phosphorylation to modulate the expression of PI3K-AKT in the pathogenesis of NAFLD, and to analyze the autophagic flux, the downstream factors related to lipid metabolism, inflammation and oxidative stress by using recombined adenovirus technology, siRNA, Western Blot, qRT-PCR, immunofluorescence and immunohistochemistry in both NAFLD in vitro and in vivo model. The findings of this project will expand the understanding of the mechanisms of NAFLD, and provide potential therapeutic targets.

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是常见的慢性肝病，其发病机制尚不明确。神经调节蛋白(NRG)家族参与能量代谢，可能与NAFLD发病相关。我们前期研究发现，NRG1能够抑制NAFLD细胞模型的脂肪变性，上调磷酸化ErbB3的表达，增加PI3K和磷酸化AKT水平。我们由此推测NRG1可能经ErbB3通过PI3K-AKT通路保护NAFLD发生发展。本研究拟构建NAFLD细胞及动物模型，运用重组腺病毒和siRNA技术建立ErbB3过表达和表达抑制模型，首先确定NRG1经肝脏ErbB3调控肝脏脂变，并检测PI3K-AKT的活性，以及自噬标志蛋白、脂质代谢和炎症反应相关蛋白的水平，从细胞自噬、脂代谢、炎症氧化应激三方面揭示NRG1/ErbB3对NAFLD的调节机制。本课题将为深入认识NAFLD的发病机制，以及探索NAFLD治疗新靶点提供思路。

非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）是常见的慢性肝病，其发病机制尚不明确。神经调节蛋白家族参与能量代谢，可能与其发病相关。本项目基于NAFLD细胞模型和动物模型，研究了神经调节蛋白1（NRG1）改善NAFLD的作用及具体机制。研究发现：1、NRG1可有效抑制NAFLD细胞模型中脂质合成，ERK通路抑制剂将抑制NRG1的改善效果。2、NAFLD细胞经NRG1处理后，NRG1、ErbB2、ErbB3、p-ERK1/2、SIRT1、p-FoxO1蛋白表达量显著增多，SREBP1c蛋白表达量显著减少；NAFLD细胞经NRG1和ERK抑制剂共同处理后，ErbB2、ErbB3、p-ERK1/2、SIRT1、p-FoxO1蛋白表达量比NRG1组减少，SREBP1c表达量增多。3、NRG1可缓解NAFLD小鼠肝脏脂变，减轻小鼠肝细胞凋亡，抑制小鼠血清TC、ALT、AST、IL-6、IL-1β、TNF-α含量的增加，加入ERK抑制剂后，NGR1的治疗效果消失。4、NRG1治疗组小鼠肝组织NRG1、ErbB2、ErbB3、p-ERK1/2、SIRT1、p-FOXO1蛋白表达增加、LC3II/I比值增加，SREBP1c蛋白表达下降，ERK抑制剂加入后，NGR1的治疗效果丧失。以上研究结果表明：NRG1通过ERK途径调控细胞炎症因子分泌，抑制氧化应激；NRG1经ErbB2-ErbB3途径激活下游ERK1/2信号通路，促进SIRT1的表达及下游信号通路的激活，增强自噬作用，保护肝细胞；同时NRG1经上述信号通路调节肝脏脂质代谢，减少脂质合成和脂肪酸摄取，减轻肝脏脂质蓄积。