表观抑制子EZH2通过维持肾癌干细胞样特性参与舒尼替尼抵抗的机制研究

Epigenetic abnormalities caused by abnormal activation of EZH2 play an important role in many tumors development including renal cell carcinoma. Our previous study found that high expression of EZH2 correlates with poor outcome in renal cell carcinoma and promotes epithelial- mesenchymal transition (EMT) via inhibiting the expression of E-cadherin. (BJU INT 2014; PLOS ONE 2013)Sunitinib is a multitargeted inhibitor of receptor tyrosine kinases(RTK). Sunitinib improved progression-free survival (PFS) compared to treatment with interferon, while the response rate was very little and majority patients eventually developed therapeutic resistance. Along with increasingly widespread sunitinib administration against mRCC, molecular mechanism and overcome strategies for sunitinib treatment therapeutic resistance await urgent elucidation for personalized molecular-targeted therapeutic to fortify efficacy and overcome resistance. It has been confirmed EMT is closely related to the characteristics of cancer stem cells and drug resistance.We found that EZH2 can induce renal cancer cell resistance to sunitinib -induced apoptosis.The project intends to apply on the basis of the above work,from the perspective of epigenetics to study that EZH2 participates in sunitinib resistance via renal cell carcinoma stem cell maintenance and lay the foundation for the molecular -targeted therapeutic and drug development.

组蛋白赖氨酸N-甲基转移酶EZH2异常活化所导致的表观遗传学异常在包括肾癌在内的诸多肿瘤发生发展中发挥重要作用。我们前期研究发现高表达EZH2与肾癌不良预后相关，并通过抑制E-cadherin的表达促进上皮间质转化（EMT）（BJU INT 2014; PLOS ONE 2013）。舒尼替尼作为晚期肾癌一线药物与干扰素相比显著延长晚期肾癌无进展生存期，然而转移性肾癌对舒尼替尼反应率较低，为了更好的个性化分子靶向治疗与减少治疗抵抗，舒尼替尼治疗抵抗的分子机制与克服策略急待阐明。已有研究证实上皮间质转化与肿瘤干细胞特性和耐药发生密切相关。我们前期发现EZH2可诱导肾癌细胞抵抗舒尼替尼诱导的细胞凋亡。本申请项目拟在上述工作基础上，从表观遗传学角度出发，研究EZH2通过肾癌干细胞样特性参与舒尼替尼抵抗的分子机制与克服策略，为开发针对EZH2高表达的肾癌分子靶向治疗临床研究和药物开发奠定基础。

背景：染色质重塑基因突变在肾癌中具有很高的发生率，关于染色质重塑促进肾癌进展的研究逐渐受到关注。目前靶向治疗在转移性肾癌中占重要地位，免疫治疗也方兴未艾。补体在肿瘤的发生发展过程中发挥重要作用。C5作为补体级联反应活化过程中的关键分子在上游信号的作用下裂解呈C5a和C5b。动物研究表明，C5a有明显的促肿瘤效应，但C5a在人组织样本中是否与预后相关尚无相关报道。.研究内容：转移性肾癌肿瘤组织中SETD2基因表达显著低于与肿瘤相邻的癌旁组织。通过免疫组化对转移性肾癌患者肿瘤组织进行检测。我们制作肾癌患者组织芯片以及服用靶向药物的转移性肾癌患者组织芯片。研究SETD2，C5a等表达情况。通过流式细胞技术研究新鲜肾癌组织样本的表达。.结果：我们发现SETD2表达缺失时转移性肾癌患者预后较差，表现为缩短的OS（p<0.001）；且更容易出现靶向治疗抵抗，PFS更短（p=0.001）。SETD2的预后意义在转移性ccRCC患者中更有价值（p<0.001），而在non-ccRCC中预后意义不大（p=0.907）。研究者进一步在大样本的临床队列通过ROC曲线分析的方法建立SETD2预测转移性肾癌预后的预后模型，发现其能够显著提升传统的Heng’s评分的预后价值。肿瘤C5a的水平与患者预后密切相关；C5a高水平患者的术后死亡风险比低水平患者高70%；这种预后效应在高分期肿瘤中更为明显。我们进一步研究SETD2表达缺失通过促进补体C5a分泌促进肾癌耐药的分子机制及临床意义并获得国自然面上项目资助。