核基质结合区蛋白SATB1调控CCR7抑制急性T淋巴细胞白血病中枢浸润的作用与机制

T-cell acute lymphoblastic leukemia (T-ALL) is a highly aggressive hematological malignancy with frequent infiltration of the central nervous system (CNS), which results in poor long-term survival, but the mechanism is unknown. Our study results showed that the expression of SATB1 was downregulated in T-ALL. Down-regulation of SATB1 expression in Jurkat cell can significantly enhance the ability of cell invasion, this result may associated with the activation of the Wnt signaling pathway. SATB1 also was found can inhibit the expression of CCR7.Because CCR7 could regulate CNS infiltration of T-ALL,so we thought if SATB1 could regulate CNS infiltration of T-ALL by effect the expression of CCR7. This project aims to collect T-ALL clinical samples, detecting the expression of SATB1 and CCR7, analyze its relationship with clinical pathological features. Chip-seq, EMSA and other methods will be used to clarify the function and mechanism of SATB1 effecting T-ALL CNS infiltration by regulates CCR7.This study may provides the basis for molecular diagnosis and targeted therapy of T-ALL.

急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）是一种高危血液系统恶性疾病，易发生中枢浸润，是其不良预后的重要原因，但机制不明。我们研究发现SATB1在T-ALL中表达下调，在细胞模型中证实其下调激活Wnt通路，增强细胞侵袭性，随后的研究提示，SATB1下调可促进CCR7的表达，而CCR7的激活与中枢浸润密切相关，那么，SATB1是否影响T-ALL中枢浸润？其机制又是什么？据此我们提出假设：SATB1识别和结合CCR7启动子区特定DNA序列，抑制CCR7的表达，T-ALL中SATB1下调促进了CCR7的表达，CCR7/CCL19通路活化促进了T-ALL中枢浸润。本项目拟通过对临床标本的检测与分析，构建细胞模型，小鼠模型，采用逆转录相关病毒，小鼠活体成像，chip-seq，EMSA等方法和工具，阐明SATB1调控CCR7在T-ALL中枢浸润中的关键作用和调控机制。为T-ALL的分子诊断及靶向治疗提供依据。

急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）是一种高危血液系统恶性疾患，好发于儿童和青少年，社会危害严重，中枢神经系统浸润是T-ALL复发率高和临床预后差的主要原因之一，然而T-ALL细胞浸润的分子机理目前仍不清楚。本研究以T-ALL为疾病模型，探讨SATB1调控T-ALL细胞浸润性的分子机制。研究发现，SATB1在T-ALL病人外周血单个核细胞中表达下调，上调SATB1表达可以抑制T-ALL细胞侵袭能力。体外实验证实下调CCR7表达可以抑制T-ALL细胞侵袭能力，蛋白表达检测提示T-ALL细胞中SATB1表达与CCR7表达具有相反的趋势，与前期检测到SATB1下调CCR7的表达相一致。chip-seq结合基因芯片分析结果发现SATB1并不结合CCR7，因此SATB1通过抑制CCR7表达从而抑制T-ALL细胞浸润能力，但并不是通过直接调控的方式。通过chip-seq联合基因表达芯片的分析，发现在T-ALL细胞中SATB1可能直接调控TXNIP基因的表达，体外实验证实下调TXNIP的表达可以促进T-ALL细胞的侵袭能力，上调TXNIP则可以抑制细胞的侵袭能力，在T-ALL细胞中过表达SATB1则TXNIP表达增高，下调SATB1的表达则TXNIP的表达亦下调，两者之间是正向调控关系，chip-PCR证实SATB1可以结合到TXNIP启动子区，结合区域为-2184bp— -1834bp，补偿实验进一步证实SATB1可以通过靶向调控TXNIP的表达抑制T-ALL细胞的侵袭能力，体内小鼠实验则证实过表达TXNIP可以抑制体内T-ALL细胞的侵袭。因此，SATB1除了通过间接抑制CCR7的表达抑制T-ALL细胞侵袭能力外，还通过直接靶向促进TXNIP的表达抑制T-ALL细胞的体内外侵袭能力，同时体内实验亦观察到TXNIP可以抑制T-ALL细胞的中枢浸润程度。