大麦条纹花叶病毒与寄主相互作用的研究

用大麦条纹花叶病毒(barley stripe mosaic virus,BSMV)感染寄主大麦后，采用RT-PCR等方法构建大麦叶片cDNA文库，然后用酵母双杂交系统筛选与BSMV的复制酶、运动蛋白、17kDa富含半胱氨酸的蛋白相互作用的寄主因子，用营养缺陷培养基进行初步筛选，通过报告基因的检测确认阳性克隆，再经测序确定它们的基因，并通过免疫共沉淀实验确认它们的体外相互作用。用BSMV的RNA，通过RT-PCR获得其全基因组，通过改造构建成BSMV基因沉默载体,利用该载体将所得到的寄主基因进行基因沉默实验,通过分析寄主对病毒复制、运动的影响，来研究这些寄主因子的功能，及病毒与寄主的相互作用，从而为BSMV病毒病的防治提供理论依据。