肺癌标志蛋白在肺癌发生中的作用及分子机理研究

肺癌是当今世界范围内最常见的恶性肿瘤之一。临床上由于缺乏早期特异性的诊断指标，70%病人在局部肺癌晚期或发生转移时才被确诊。我们采用SELDI蛋白质芯片技术从肺癌病人血清中已成功筛选出15个肺癌标志蛋白。本课题在上述研究的基础上，采用LCM和SELDI蛋白质芯片技术，从肺癌病人组织中筛选肺癌标志蛋白，挑选部分标志蛋白进行质谱(MS/MS)分析和蛋白质数据库查询，获得其氨基酸序列。对其中新的蛋白或功能未确定的蛋白或功能蛋白合成相应的引物，从自行构建的肺癌细胞的cDNA 文库中钓取其cDNA全长或通过5'RACE 延伸获得其全长cDNA序列。构建cDNA表达质粒和RNAi表达质粒，分别转染不同的肺癌细胞株，检测转染细胞的增殖情况、恶型表型，以及细胞同步在G1期时的蛋白质谱变化。上述内容的研究将为阐明肺癌发生的分子机理奠定理论基础，同时为肺癌的早期诊断、治疗和控制肺癌复发与转移有重要的指导意义。