口腔干预措施对动脉粥样硬化影响的实验动物研究

To investigate the influence of oral interventions on animals with periodontitis and atherosclerosis. We established chronic periodontitis(CP) and atherosclerosis model in SD rats and minipigs, simulating all kinds of oral interventions (including natural progression, tooth extractions, systemic antibiotics, scaling and root planning, SRP) to explore the possible relationship between periodontal diseases and atherosclerosis. Based on our previous study, we optimize the treatment methods of tooth extractions and SRP by the use of antimicrobial and lipoids-decreasing agents. Serum high sensitive C-reactive protein (hsCRP), interleukin-6 (IL-6), total cholesterol, triacylglycerol（TG）, high density lipoprotein cholesterol (HDL-c)and low density lipoprotein cholesterol (LDL-c) levels were all evaluated before and after periodontal interventions by enzyme-labeled immunosorbent assay (ELISA). The pathological lesion of carotid artery plaque was stained with hematoxylin and eosin (HE) and immunohistochemistry. To detect periodontopathic bacterial DNA in atherosclerotic vascular lesions by using polymerase chain reaction ( PCR) techniques. The results will be helpful for us to elucidate the relationship between periodontal diseases and atherosclerosis and will benefit us to select rational oral therapy sequence and strategy to the prevention of atherosclerosis and reducing cardiovascular events in patients with periodontitis associated with systemically cardiovascular diseases or systemic inflammation.

通过建立CP、As及CP+As的SD大鼠模型和小型猪模型，模拟临床牙周病患者在牙周炎自然发展中采取的几种处理方法（不治疗、牙周基础治疗、单纯药物治疗及拔除患牙），并在前期实验结果的提示下，优化更多的处理因素（降脂治疗、抗生素及抗炎治疗），采用ELISA法检测血清炎症因子水平（CRP和IL-6）和血脂检测；光镜下观察牙周组织和颈动脉血管壁组织的病理变化，用免疫组织化学技术检测MMP-2和MMP-9在颈动脉血管组织中的表达，对As及CP+As组的动脉内膜标本，采用PCR技术检测5种牙周可疑致病菌，从炎症因子、致病菌及病理组织学角度阐明牙周病与AS之间的相关性机制。研究结果可望为阐明安全合理的口腔治疗程序和措施是否有利于预防或者减少心血管疾病，为临床医师治疗伴有As的牙周病患者选择安全合理的治疗方案提供有价值的实验依据，防止严重心脑血管事件的发生，具有重要理论意义和临床应用价值。

本研究通过建立CP、As及CP+As的SD大鼠模型，模拟临床牙周病患者在牙周炎自然发展中采取的几种处理方法（不治疗、牙周基础治疗、单纯药物治疗及拔除患牙），并在前期实验结果的提示下，增加了大鼠的数量、优化了干预措施，并延长了观察时间，采用ELISA法检测血清炎症因子水平（CRP和IL-6）；光镜下观察牙周组织和颈动脉血管壁组织的病理变化，用免疫组织化学技术检测MMP-2和MMP-9在颈动脉血管组织中的表达，对As及CP+As组的动脉内膜标本，采用PCR技术检测牙周可疑致病菌。.结果发现：未干预组的血清炎症因子CRP、IL-6含量随时间推移逐渐升高，在最后时间点，复合组自然进程组的CRP、IL-6水平最高，病理改变最严重，全部出现典型的AS病理改变，管壁增厚、内皮细胞和平滑肌细胞出现空泡性变、纤维帽及斑块形成。病变的严重程度与CRP和IL-6含量显示了一致性；血管壁MMP2、MMP-9的免疫组化染色的结果也显示了与HE结果的一致性；所有口腔干预组血清炎症因子CRP、IL-6含量出现先升后降，在第二次干预后1周达到峰值，拔牙组含量最高。随后开始降低，最后都达到低于其各自的基线水平，并且均低于所有自然进程组，且颈动脉病理显示出牙周基础治疗疗效最为显著；在所有大鼠中（包括正常对照组），均检出牙龈卟啉单胞菌，自然进程组相对含量最高。结果提示：牙周炎及高脂血症如果不进行干预而任其自然发展可以明显增加血清炎症因子水平，二者同时存在可能具有叠加效应，可能会明显增加形成As的风险；无论伴或不伴高脂血症的牙周炎大鼠，进行牙周干预后均会出现短期的血循环炎症因子水平的升高，尤其是对于伴有高脂血症的牙周炎大鼠，牙周基础治疗引起的短期内血循环炎症因子水平的升高可能会增加As的发生风险，而从长期作用来看对颈动脉血管As病变的改善是有益的。有创治疗后辅助抗生素的方案都优于单纯的有创治疗。.研究结果为临床医师治疗伴有As的牙周病患者选择安全合理的治疗方案提供有价值的实验依据，为防止严重心脑血管事件的发生，具有重要理论意义和临床应用价值。