基因转移和表达是基因治疗的基础,克隆目的基因,高效的转基因方法、合适的受体细胞及外源基因表达的控制是基因转移的基本要求,本课题采用逆转录病毒介导的基因转移的研究二氢叶酸还原酶基因在造血细胞的转移和表达,以求通过增加正常细胞抗药性而提高化疗耐受性,实验研究的结果证明二氢叶酸还原酶基因在大肠杆菌中质粒DNA扩增,并转染PA317包装细胞,积胶电泳鉴定逆转泵病毒载体PSPD为700bp的DNA带,PA317细胞以MT×10(-6)M筛选,DMEM培养液中2月,混合克隆PA317/PSPD细胞生长旺盛,应用斑点杂交,以dhfr cDNA片段为探针证明PA317/PSPD及NIH3T3/PSPD细胞均有外源dhfr基因导入,阐明逆转采病毒载体介导的基因具有转移率高,前病毒相对稳定整合。
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数据更新时间:2023-05-31
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