病原菌与宿主细胞的相互作用是决定其感染的前提。肠出血性大肠杆菌 O157:H7紧密粘附素与其受体Tir的结合是引发粘附与擦拭(A/E)损伤造成感染的关键。Tir作为O157细菌表达的蛋白却在宿主细胞上发挥作用,其如何转位并整合至肠上皮细胞膜迄今未见报道。了解其转位过程及机制对阐明O157的致病机理、寻找有效的治疗手段具有重要的理论指导意义。基于目前对Tir蛋白认识和宿主细胞膜蛋白转位的研究,本课题拟通过基因敲除、免疫组化、免疫电镜、Western-blot和 RNAi等技术,观察野生型、内质网转运蛋白识别基序突变后的O157菌株感染HeLa细胞以及内质网摄取、转运和高尔基体形成转运小泡相关基因分别过表达或抑制后Tir在细胞中的定位和表达情况,来验证Tir经细菌分泌转导入宿主细胞、再借助细胞内膜系统整合至宿主细胞膜表面可能的转位途径。预期研究结果可发表SCI论文2篇,培养博士1名、硕士2名。
病原菌与宿主细胞的相互作用是决定其感染的前提。肠出血性大肠杆菌 O157:H7紧密粘附素与其受体Tir 的结合是引发粘附与擦拭(A/E)损伤造成感染的关键。Tir 作为O157 细菌表达的蛋白却在宿主细胞上发挥作用,其如何转位并整合至肠上皮细胞膜迄今未见报道。了解其转位过程及机制对阐明 O157 的致病机理、寻找有效的治疗手段具有重要的理论指导意义。基于目前对Tir 蛋白认识和宿主细胞膜蛋白转位的研究,本课题拟通过基因敲除、免疫荧光、免疫电镜、Western-blot 、亚细胞器提取和RNAi 等技术,观察野生型、内质网转运蛋白识别基序突变后的O157 菌株感染HeLa细胞以及内质网摄取、转运和高尔基体形成转运小泡相关基因分别过表达或抑制后Tir在细胞中的定位和表达情况,来验证Tir 经细菌分泌转导入宿主细胞、再借助细胞内膜系统整合至宿主细胞膜表面可能的转位途径。
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数据更新时间:2023-05-31
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