预构血管化支架以构建大体积岛状组织工程化脂肪瓣的实验研究

自体组织瓣的来源是软组织缺损修复中所面临的最核心难题与挑战，脂肪组织工程技术此提供了一条令人鼓舞的新思路。目前虽已有组织工程化脂肪构建成功的报道，但其体积均无法超过1ml，且能应用于显微外科移植的岛状组织工程脂肪瓣的构建仍旧空白。如何使种子细胞在移植后迅速获得充分及时的血供以存活是获得大体积组织工程化脂肪组织，甚至是岛状组织工程化脂肪瓣的技术关键。本研究拟采用细胞生物学技术，组织工程构建技术，显微外科移植等，使用新型自主设计研发并重点针对血管化诱导的胶原支架，探讨如何通过预构组织工程支架，保证其充分血管化，以促进后期移植种子细胞的存活及成脂分化，从而获得大体积的工程化脂肪。同时通过显微外科技术，将携带血管蒂的岛状组织工程化脂肪进行异位移植，并探讨大体积岛状组织工程脂肪瓣血管营养系统重建的机制，为大体积的组织工程化脂肪甚至岛状组织工程化脂肪瓣的构建打下坚实的理论基础,并提供实验依据。

自体组织瓣的来源是软组织缺损修复中所面临的最核心难题与挑战，脂肪组织工程技术此提供了一条令人鼓舞的新思路。目前虽已有组织工程化脂肪构建成功的报道，但其体积均无法超过1ml，且能应用于显微外科移植的岛状组织工程脂肪瓣的构建仍旧空白。如何使种子细胞在移植后迅速获得充分及时的血供以存活是获得大体积组织工程化脂肪组织，甚至是岛状组织工程化脂肪瓣的技术关键。.本研究采用了细胞生物学技术，组织工程构建技术，显微外科移植等，使用新型自主设计研发并重点针对血管化诱导的胶原支架，研究了组织工程支架的血管化预构及组织构建。同时引进并发展了基于血管预构的组织工程室方案，获得了大体积的工程化成熟脂肪组织，本实验利用带蒂脂肪瓣结合诱导脂肪新生的胶原海绵支架，在大鼠模型中成功构建出大体积新生脂肪组织，4周后新生组织的体积从原来的0.08±.0.009ml增长为1.3±0.0.12ml，组织HE染色证实新生的组织为成熟的脂肪组织，并且组织内富含血管，脂肪细胞大小正常，未见萎缩、肥大及纤维化，被纤维间隔分为若干小叶（图7），脂肪瓣的远端依然有充足的血液供应（图8），基本实现了大体积岛状组织工程化的脂肪瓣的构建。.在此基础上，我们进一步探讨了工程室内新生组织的细胞来源及形态改变。实验结果证实新生的脂肪细胞可能来源于原生组织内的间充质干细胞，由室内物理或化学成脂信号募集到目标部位，在成脂环境下进行分化形成成熟脂肪细胞。.在此国家自然科学基金的资助下，我们共撰写SCI英文论文12篇，已接收或发表3篇，发表中文核心期刊论文8篇，顺利完成了国家自然科学基金的既定研究目标，为今后构建大体积岛状组织工程化脂肪瓣及临床应用奠定了良好的工作基础。