水稻WRKY IIa亚组成员的功能以及其与脱落酸的关系研究

WRKY转录因子家族，参与了植物抗病、抗逆、生长和发育等过程。本项目将研究水稻WRKY IIa亚组4个成员受病原菌和逆境胁迫诱导下的表达情况；分析这4个转录因子间的物理互作以及功能间的关系，水稻WRKY融合蛋白与含W盒DNA的结合，WRKY的转录激活或者转录抑制活性。研究超表达和抑制表达转基因后代抗病性和抗逆性变化，了解它们可能参与的信号传导网络。分析水稻WRKY可能调控的靶基因。特别是，通过酵母双杂交发现其中1个WRKY能与脱落酸受体互作，将研究这些 WRKY因子与ABA及其信号传导途径间的关系。

WRKY转录因子在植物免疫等方面起着重要作用。本项目发现水稻WRKY IIa亚组成员OsWRKY62和76存在组成型和诱导型的选择性剪接方式。全长的OsWRKY62.1和OsWRKY76.1能形成同源和异源复合物，双分子荧光实验结果表明异源复合物主要积累在烟草叶片的细胞核内。超表达OsWRKY62.1和OsWRKY76.1植株比野生型水稻更感稻瘟菌和白叶枯菌，而RNAi干涉植株或者同时干涉这两个基因的植株（dsOW62/76）增强了对病原菌的抗性。OsWRKY62与OsWRKY76的敲除体和dsOW62/76植株中，抗病相关基因的表达以及植保素的积累都有极大地提高。特别是OsWRKY62.1和OsWRKY76.1分别与其选择剪接体的比率在dsOW62/76植株中和稻瘟菌侵染叶片中发生变化。选择型剪接转录本编码较短的蛋白（OsWRKY62.2和OsWRKY76.2），它们能与全长蛋白互作。在烟草叶片中OsWRKY62.2没有转录抑制活性，并从OsWRKY62.1的N端鉴定出两小段序列起到转录抑制的作用。选择剪接体OsWRKY62.2或OsWRKY76.2的N端与W盒的结合能力要低于相应正常转录本编码蛋白与DNA结合的结合活性。研究结果对解析转录因子与DNA结合、转录抑制域、反馈负调控以及选择型剪接等有重要意义。.主要研究结果投稿Plant Physiology，已基本接受。另外，受该项目的资助还展开了相关的研究，发表论文3篇。