调控Aurora A的microRNA鉴定及其抑制前列腺癌生长研究

前列腺癌是常见的恶性肿瘤，探索其治疗方法具有重要意义。激光激酶A（Aurora A）与肿瘤的发生发展密切相关。申请者发表于"Cancer gene therapy"杂志的研究证明了Aurora A在前列腺癌发生发展中发挥重要作用。在前期工作中，我们经生物信息学预测了可能靶向调控Aurora A 基因的microRNA, 发现其与microRNA表达谱芯片筛查到的前列腺癌和正常组织差异表达的microRNA有重叠，推测某些特异性的microRNA表达变化可能是前列腺癌细胞上调Aurora A基因表达的重要机制。本项目拟筛选鉴定可能靶向调控Aurora A基因的microRNA分子，证明其为前列腺癌细胞上调Aurora A基因表达的新分子机制。同时，考虑到microRNA分子更高的稳定性和更好的组织相容性，我们将通过细胞和动物实验探索应用microRNA阻断前列腺癌生长的新措施。

前列腺癌是最常见的恶性肿瘤之一，严重影响患者生存质量。手术是前列腺癌的主要治疗手段，但常带来严重泌尿道副作用。因而，发展前列腺癌的生物治疗策略十分迫切和重要。激光激酶A（Aurora A）在前列腺癌发生发展中发挥重要作用，使其成为前列腺癌治疗的良好靶标。微小RNA（microRNA）是近年来发现的内源性调控基因表达的重要分子，特异microRNA与癌症发生发展密切相关，因而本项目研究靶向Aurora A的microRNA并探讨其对前列腺癌生长的作用。我们收集了前列腺癌组织及相应腺旁组织，采用Western Blot和Real-time RT-PCR，检测组织Aurora A表达和let-7b/d/g, miR-23a/b,miR-92a/b,MiR-199a-3P及miR-24分子表达，发现miR-199a-3P表达下调比率最高，且与Aurora A蛋白表达上调呈密切相关性(R2=0.92)。将MiR-199a-3P的激动剂angomir和抑制剂antagmir转染体外培养的前列腺细胞，发现angomir转染细胞Aurora A蛋白表达明显下调，细胞生长变慢。我们继而构建了Du145前列腺癌裸鼠移植瘤，瘤体内多点注射miR199a-3p agomir及对照，发现miR199a-3p angomir能明显抑制肿瘤生长，抑制Aurora A蛋白表达，而增加肿瘤组织cleaved caspase 3表达。在体外培养的前列腺癌细胞株Du145中加入甲基转移酶抑制剂AZA处理，发现miR-199a基因甲基化减少，miR-199a-3p expression表达上调，而Aurora kinase A 表达减少，提示前列腺癌细胞中miR-199a-3p的表达与其基因甲基化程度相关。以上结果表明，靶向Aurora A的microRNA可望成为前列腺癌治疗的新策略。