p21RAS小肽抗T淋巴母细胞淋巴瘤/白血病的作用与机制研究

Many studies have found that Ras signaling pathway activation related to T lymphoblastic lymphoma/leukemia (TLL). But we know very little about the effect of anti-Ras in TLL therapy. Previously, we synthesized p21RAS peptide first which was a negative regulator of Ras. We found that p21RAS peptide inhibited proliferation and induced apoptosis in VSMC cells, and inhibited proliferation and induced apoptosis more significantly in Jurkat cells though the preliminary experiments. Our recently research discovered that miRNA-19 activated NF-κB signaling pathway, and induced the uncontrolled proliferation of Jurkat cells. In this project, we try to further explore the effect of p21RAS peptide in Jurkat cells both in vitro and in vivo as well as the underlying molecular mechanisms. We will focus on evaluating Ras and NF-κB signaling activation and miRNA-19 expression especially. This project will provide evidence for the effect of p21RAS peptide both in Jurkat cells and in nude mouse model. It will provide the new strategy and target in TLL treatment, as well as the potential social and economic value.

众多研究发现Ras信号通路高度活化与T淋巴母细胞淋巴瘤/白血病（TLL）有密切关系，但是抑制Ras对TLL的治疗研究知之甚少。我们前期研究首次合成具有负向调控Ras活性的p21RAS小肽，首次发现该小肽高效抑制Ras活性，并显著抑制大鼠平滑肌细胞增殖和促进其凋亡。我们进一步研究发现，该小肽抑制Jurkat细胞增殖并诱导其凋亡的作用效果更好；miRNA-19可激活NF-κB信号通路，导致Jurkat细胞增殖失控。本课题拟从细胞水平和动物水平，研究p21RAS小肽抑制Jurkat细胞增殖并诱导其凋亡的作用及分子机制，特别是对Ras信号通路的调控机制及核内NF-κB表达水平的影响，探索该小肽在离体Jurkat细胞及裸小鼠模型中的作用机制，可为将来治疗TLL提供新策略和新靶点，具有很大的社会经济价值。

众多研究发现Ras信号通路高度活化与T淋巴母细胞淋巴瘤/白血病（TLL）有密切关系，但是抑制Ra相关信号通路s对TLL的治疗研究却少见报道。我们前期研究首次合成具有负向调控Ras活性的p21RAS多肽，首次发现该小肽高效抑制Ras活性，并显著抑制大鼠平滑肌细胞增殖，并促进其凋亡。随后的预实验，我们发现该多肽抑制Jurkat细胞增殖并诱导其凋亡的作用效果更好。本课题通过合成的p21RAS多肽，从细胞水平和动物水平，利用CCK-8法、流式细胞术、realtime-PCR、western blot、病理组织学技术等实验方法，研究p21RAS多肽从体内外抑制Jurkat细胞增殖并诱导其凋亡的作用及分子机制，特别是对Ras信号通路的调控机制及NF-κB表达的影响，探索该多肽在抑制Jurkat细胞增殖中发挥的作用及其机制。首先，我们通过固相合成法合成p21RAS多肽，并顺利完成TLL裸鼠模型的建立。随后，通过本项目的实施，我们发现，p21RAS多肽可抑制Jurkat细胞增殖，使Jurkat细胞发生细胞周期阻滞。在TLL动物模型中，Jurkat细胞可抑制TLL动物中T淋巴细胞异常增殖。最后，通过realtime-PCR、western blot等实验室方法检测，我们发现p21RAS多肽是通过提高细胞内Mfn2的表达，抑制Ras相关信号通路的活性，抑制Akt磷酸化，抑制NF-κB的表达，发挥其抑制Jurkat细胞增殖，并促进其凋亡的作用，这为将来治疗TLL提供新策略和新靶点，具有很大的社会经济价值。