基于AMPK-SREBP-1c和LPL通路研究粗壮女贞单萜苷治疗高甘油三酯血症的作用机制

A large number of studies show that hypertriglyceridemia plays a critical role in the development of atherosclerosis.The prevalence of hypertriglyceridemia is much higher than that of hypercholesterolemia in Chinese adults. At present, fibrate is the main clinical drug for treatment of hypertriglyceridemia, as it has large side effects. Therefore, it is necessary to study and explore new drugs for the treatment of hypertriglyceridemia. Our previous study found that the monoterpene glycoside from Ligustrum robustum (Roxb.) Blume (CNDT) could exhibite significant hypotriglyceridemic effect by inhibition of liver lipid synthesis and promotation of LPL activity to accelarate TG catabolism in hyperlipidemic hamster. Recent studies have found that lipid synthesis pathway and LPL pathway are the key pathways to determine the concentrition of plasma TG. Accordingly, we plan to use the hypertriglyceridemia model of hamster induced by high fat diet, and lipid accumulation model of HepG2 cells induced by oleic acid, to explore the hypotriglyceridemic mechanism of CNDT in this study. We plan to detect the mRNA and protein expression of key enzymes ACC、SCD1 etc. and important regulatory proteins AMPK、SREBP-1c etc. in the lipid synthesis pathway. Also we will determine the activity and expression of LPL, a key enzyme of TG catabolism, and the expression of its regulatory proteins Angptl 3/4/8 and ApoA V etc.

大量研究证明高甘油三酯血症与动脉粥样硬化的发生发展密切相关。我国成人高甘油三酯血症患病率远高于高胆固醇血症。而目前临床主要应用贝特类药物治疗高甘油三酯血症，其存在较大副作用。因此，依然需要积极地研究和探索新型的治疗高甘油三酯血症药物。我们的前期研究发现粗壮女贞单萜苷CNDT能通过抑制高脂血症金黄地鼠肝脏脂质合成以及促进LPL分解血TG，从而发挥降TG作用。而最新的研究发现脂质合成通路和LPL通路是决定血中TG含量的关键通路。基于以上基础，本项目拟采用高脂饲料诱导的金黄地鼠高甘油三脂血症模型，以及油酸诱导的HepG2细胞脂质堆积模型，通过检测脂质合成通路上关键酶ACC、SCD1等及重要调控蛋白AMPK、SREBP-1c等的mRNA和蛋白表达水平，TG分解代谢关键酶LPL的活性、表达水平及其调控蛋白Angptl 3/4/8、ApoA V等的表达水平，探索CNDT治疗高甘油三酯血症的作用机制。

大量研究证明高甘油三酯血症与动脉粥样硬化的发生发展密切相关。我国成人高甘油三酯血症患病率远高于高胆固醇血症。而目前临床主要应用贝特类药物治疗高甘油三酯血症，其存在较大副作用。因此，依然需要积极地研究和探索新型的治疗高甘油三酯血症药物。我们的前期研究发现粗壮女贞单萜苷CNDT能通过抑制高脂血症金黄地鼠肝脏脂质合成以及促进LPL分解血TG，从而发挥降TG作用。而最新的研究发现脂质合成通路和LPL通路是决定血中TG含量的关键通路。基于以上基础，本项目采用高脂饲料诱导的金黄地鼠高甘油三脂血症模型，以及油酸诱导的HepG2细胞脂质堆积模型，通过检测脂质合成通路上关键酶ACC、SCD1等及重要调控蛋白AMPK、SREBP-1c等的mRNA和蛋白表达水平，TG分解代谢关键酶LPL的活性、表达水平及其调控蛋白Angptl 3/4/8、ApoA V等的表达水平，探索CNDT治疗高甘油三酯血症的作用机制。.结果如下：(1)与模型组相比，CNDT可以显著性的降低血清中TC、TG、LDL-C和NEFA的水平并且可以显著性的降低肝脏中TC及TG含量，此外，CNDT还可以改善脂质堆积造成的肝细胞损伤及脂肪细胞病变。(2)与模型组相比，CNDT给药组金黄地鼠肝脏中ANGPTL 3、ANGPTL 4、ANGPTL 8 mRNA的表达显著下调，地鼠脂肪中ANGPTL 4 mRNA的表达同样显著性减弱，而肝脏和脂肪中LPL mRNA表达明显上调，表明CNDT可以通过抑制ANGPTL3、4、8的活性来激活LPL，从而加快对血中TG的清除。(3)与模型组相比，CNDT给药组金黄地鼠肝脏中AMPK及SREBP-1c的磷酸化蛋白水平显著上调，而CHREBP及SCD 1、ACC、GPAT、AGPAT 2等的mRNA表达被显著性抑制，表明CNDT可以通过激活AMPK-SREBP-1c通路减少脂质合成。(4) CNDT、粗壮女贞C及其碱水解产物对羟基肉桂酸和去对羟基肉桂酰粗壮女贞苷C均具有改善HepG2细胞脂质堆积的作用。.本研究应用金黄地鼠高脂血症模型和油酸诱导的HepG2细胞脂质堆积模型证明了CNDT具有很好的降脂作用，并基于脂质合成通路和LPL通路研究了CNDT的降脂机制。